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- 2026年10月12日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
细胞系
- 供应商：
雅吉生物
- 库存：
10株
- 生长状态：
优
- 年限：
5-7年
- 运输方式：
常温/干冰
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 组织来源：
白血病
产品名称：人B细胞前体白血病细胞MHH-CALL-3细胞
货期：购买前请咨询我们确认是否有现货
规格：1×10^6cells/T25培养瓶
运输：复苏发货包邮，冻存发货需加干冰运费费
带鉴定报告：
人B细胞前体白血病细胞MHH-CALL-3细胞 培养条件：
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培养条件 |
气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃ |
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传代方法 |
第一次建议1:2传代 |
传代情况 |
2天换液 |
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备注 |
建议同时购买完培，同时购买非常优惠，具体培养体系联系我们 |
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细胞收到后处理
培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶，消毒后放到超净台内严格无菌操作，将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处理。显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（最好40x,100x,200x各一张），前三天照片是重要售后依据，不提供照片默认收到状态良好。（换液后将瓶盖拧松）
人B细胞前体白血病细胞MHH-CALL-3细胞 细胞培养步骤
a、细胞传代：如果未超过80%汇合度时，将瓶装的完全培养液收集至离心管中，留5ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；如果细胞密度超80%，即可进行传代培养。
贴壁细胞传代步骤如下：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，使之完全脱落后吸出，然后将悬液转移至15ml离心管中，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL完全培养基重悬。
4. 将细胞悬液按1：2的比例进行分瓶传代（两个T25瓶），补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，最后放入到37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。
悬浮细胞传代步骤日下：
1、半换液法
半换液处理，竖着培养瓶在培养箱静置1小时左右，轻轻吸掉3ml左右培养基，然后补给3ml的完全培养基，如果培养基变色慢，可直接加500ul左右FBS，传代的时候可以直接补给5ml培养基 分两个培养瓶培养，一般这样传代3次左右可以离心传代一次，去掉死细胞。
2、离心换液法
如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm，离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
b、细胞冻存：
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃T25培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心 5min；
3、 弃上清，沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液（货号：C7001），混匀后加入冻存管中。
4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要将细胞转入液氮罐中，则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上再转入液氮罐中。
C、细胞复苏：
1、从液氮中取出细胞冻存管（注意佩戴防护面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻， 直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3、弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种至T25培养瓶，放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养；
4、第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
注意事项：有些细胞贴壁不牢，在运输过程中容易发生细胞脱落，这是正常现象。如脱离较多可将培养瓶所有培养液收集至离心管，1000rpm离心5min，收集上清作过渡培养（后期对比培养），沉淀加入胰酶1-2ml，轻轻吹打，重悬，消化1-2分钟后，加5ml完全培养基终止反应。再离心，弃上清，加1-2ml完全培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代（两个T25），补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养。
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文献和实验B 细胞抗原受体 B细胞抗原受体(BCR)具有抗原结合特异性，在同一个体内，其多样性高达109 ～1012 ，构成容量巨大的BCR库，赋予个体识别各种抗原、产生特异性抗体的巨大潜能。 在成熟B细胞表面，Iga、Igp总是和BCR共同表达，形成BCR-Igα/Igβ复合体，前者识别抗原，后者转导BCR接受的抗原刺激信号。 (一)BCR分子 BCR主要包括mlgM和mlgD，由两条重链
B细胞可通过BCR结合抗原并发生胞吞(cndocytosis)摄人BCR-Ag复合物。在抗原加工区室CⅡV中，抗原被降解成肽段，然后抗原肽与进入区室的MHCⅡ类分子结合，表达于B细胞表面并提呈给CD4T细胞。需要指出的是，B细胞以其BCR识别的抗原表位不同于它提呈的供T细胞识别的表位，两者分别来自半抗原和与之结合的载体蛋白(图1-1)，也可以来自同一抗原分子的B表位和T表位。而且，B细胞与其他APC相比，有以下特点：①对抗原的识别和结合显示特异性。这保证了B细胞激活后最终产生的抗体能与相应
CTL 前体细胞的激活分化 CD8阳性CTI，的成熟分化由抗原驱动。与初始CD4T细胞一样，CTI。前体即初始CD8T细胞的激活和分化，也需要两个信号。第一信号来自TCR对pMHC I类复合结构的识别，提呈这一结构的，主要是非专职APC。第二信号的来源可能有两种途径：一是活化CD4 T细胞释放的细胞因子，可作用于靶细胞，使其表达协同刺激分子(如B7)；二是直接由活化的CD4T细胞提供IL-2，后者与CTL前体表面的IL-2受体结合，促进其增殖分化。
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