O1875-5G默克Merck Sigma-Aldrich

蛋白质免疫检测技术服务

 2.5ml 二硫叔糖醇（DTT，MW154.5） 0.39g SDS   0.5g 溴酚蓝    0.025 甘油    2.5ml 混匀后，分装于 1.5ml离心管中，4℃保存。 电泳液缓冲

蛋白质双向电泳过程与体会

双向电泳IEF （sigma）IEF（not IPG）/SDS-PAGE最简单的装备推荐如下，适合于没多少money做IPG又想做“热”的所谓蛋白质组的，嘻嘻！IEF用Biorad的圆盘电泳槽（不行用国产的吧，不推荐），SDS-PAGE用六一厂的就可以了（ft，六一厂应该给我money吧，给你做广告了）（money不是很多的强烈推荐六一的，买进口电泳槽的钱留出来测搞出的差异蛋白质的序列吧，呵呵）BIO－RAD 的圆盘电泳槽，国产的不推荐，因为 上槽 Biorad 的铂金丝凹进去了一点

Western Blot中的三大问题

这个标记内参的10次使用装) 图示: A-G分别表示不同实验小鼠心脏蛋白(上样量50ug)，兔抗小鼠Akt抗体(康成生物Cat#KC-5A01)检测心脏组织匀浆中Akt水平。加入兔二抗(康成生物Cat#KC-RB-035，稀释比例为1：5，000)时同时加入HRP标记的抗GAPDH单抗(稀释比例为1：10，000，康成生物Cat#KC-5G5)。采用化学发光试剂盒(康成生物Cat#KC-420)及X胶片曝光显影。一次反应即可同时检测目的蛋白(Akt)与内参GAPDH的含量。