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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
见包装
- 保质期:
12个月或见包装
- 英文名:
Abcam Recombinant Human IRAK4 protein (GST tag N-Terminus)
- 库存:
999
- 供应商:
北京泽平
- CAS号:
不适用
- 规格:
10μg
重组人IRAK4蛋白(GST标签N端)是一种人全长蛋白,氨基酸长度为1至460个,在小麦胚芽中表达,适用于ELISA、WB、FuncS等检测。
- 货号:ab153333
- 中文名称:重组人IRAK4蛋白(GST标签N端)
- 英文名称:Recombinant Human IRAK4 protein (GST tag N-Terminus)
- 规格:10μg
- 品牌:艾博抗Abcam
- 产地:美国/英国/中国杭州
- 货期:热销品现货,其他请咨询
- 资质:Abcam一级代理商
- 中文别名:白细胞介素-1受体相关激酶4,IRAK-4,肾癌抗原NY-REN-64,IRAK4
- 英文别名:Interleukin-1 receptor-associated kinase 4, IRAK-4, Renal carcinoma antigen NY-REN-64, IRAK4
- 详细参数:表达系统小麦胚芽标签GST标签N端应用FuncS、WB、ELISA生物活性否登录号Q9NWZ3无动物源性否无载体否物种人储存缓冲液pH:8成分:0.79% Tris-HCl,0.31%谷胱甘肽
- 成分和储存条件:形式:液体纯化技术:专有技术运输条件:干冰适宜短期储存条件:-80°C适宜长期储存条件:-80°C分装信息:交付时分装储存信息:避免反复冻融
- 重组蛋白序列概况:登录号Q9NWZ3蛋白质长度全长氨基酸1至460天然重组表达系统小麦胚芽标签GST标签N端
- 重组蛋白真实序列:M N K P I T P S T Y V R C L N V G L I R K L S D F I D P Q E G W K K L A V A I K K P S G D D R Y N Q F H I R R F E A L L Q T G K S P T S E L L F D W G T T N C T V G D L V D L L I Q N E F F A P A S L L L P D A V P K T A N T L P S K E A I T V Q Q K Q M P F C D K D R T L M T P V Q N L E Q S Y M P P D S S S P E N K S L E V S D T R F H S F S F Y E L K N V T N N F D E R P I S V G G N K M G E G G F G V V Y K G Y V N N T T V A V K K P A A M V D I T T E E L K Q Q F D Q E I K V M A K C Q H E N L V E L L G F S S D G D D L C L V Y V Y M P N G S L L D R L S C L D G T P P L S W H M R C K I A Q G A A N G I N F L H E N H H I H R D I K S A N I L L D E A F T A K I S D F G L A R A S E K F A Q T V M T S R I V G T T A Y M A P E A L R G E I T P K S D I Y S F G V V L L E I I T G L P A V D E H R E P Q L L L D I K E E I E D E E K T I E D Y I D K K M N D A D S T S V E A M Y S V A S Q C L H E K K N K R P D I K K V Q Q L L Q E M T A S
- 靶点概况:丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在启动针对外来病原体的先天免疫反应中发挥关键作用。参与Toll样受体(TLR)和IL-1R信号通路(PubMed:17878374)。TLR激活后,MYD88迅速将其募集到受体信号复合物,与IRAK2共同形成Myddosome。Myddosome首先磷酸化IRAK1,从而刺激激酶活性并促进IRAK1的强烈自磷酸化。Myddosome还磷酸化E3泛素连接酶Pellino蛋白(PELI1、PELI2和PELI3),促进Pellino介导的IRAK1多聚泛素化。随后,IKBKG/NEMO的泛素结合域与多泛素化的IRAK1结合,从而将IRAK1-MAP3K7/TAK1-TRAF6复合物和NEMO-IKKA-IKKB复合物聚集在一起。反过来,MAP3K7/TAK1激活IKK(CHUK/IKKA和IKBKB/IKKB),导致NF-κB核转位和激活。此外,MAP3K7/TAK1磷酸化TIRAP,促进其泛素化和后续降解。在LPS刺激后,MAP3K7/TAK1磷酸化NCF1并调节NADPH氧化酶的激活,提示在微生物感染过程中可能存在类似的机制。
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文献和实验后继的亲和纯化。目前最为流行的融合标签自然是 His-Tag,和 GST,来自 G-Biosciences 等公司都有质量非常稳定可靠的产品,种类还特别丰富,分别对应不同的上样量和工作压力和流速的需要。笔者在这里介绍一下江湖中盛传的 Tag 蛋白纯化的「刀剑笑」,目的就是为在产品选择上帮你省点事...... 「横刀」-蛋白亲和纯化 GST 树脂 G-Biosciences 的谷胱甘肽树脂,用于分离 GST 重组蛋白 用来亲和纯化带有 GST 标签的蛋白。树脂由还原性的谷胱甘肽通过 10
。加入过量的螯合剂(EGTA)螯合Ca2+,使纯化的复合物与层析柱分离。 TAP 纯化时存在蛋白污染问题,很难判断这些蛋白是真正的相互作用,还是蛋白处理过程中的副产品。为此,有人建议用三标签的方法[19],但实验表明该法也不能排除蛋白的污染。其他标签也有应用,比较流行的是Flag[20]。GST、His6、生物素等也分别用于蛋白纯化,但由于他们有限的亲和力及较高的背景,在大规模的蛋白质相互作用研究中未得到广泛应用。选择何种标签也许是个难题,每种标签都有自身的弱点:大标签适于规模较大的相互作用研究
功能分析才能验证是否复性。GST融合蛋白可以免疫动物,但抗体纯化须用GSH-sepharose 4B 和蛋白A或G进一步纯化,去掉抗GST抗体,如果你的目的蛋白很大,可以凝血酶切割除去 GST,再免疫动物.GSH,Tris 是小 分子,没影响。 5) 既然目的蛋白没有活性,何来得活性鉴定,复性是否成功,就主要是看是否恢复到原来特有的三级结构,这就要看你目的蛋白的特异性,和天然的目的蛋白片断进行比较,看其复性是否彻底,这必须有个对照,才能知道复性是否完全。不知道你得到目的蛋白有什么用处,如果是用来做抗原
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