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重组 Art v 1 蛋白(植物瞬转表达 · 含天然 O-糖基化)— 蒿属/艾蒿花粉主要过敏原
重组 Art v 1 蛋白(植物瞬转表达 · 含天然 O-糖基化)— 蒿属/艾蒿花粉主要过敏原
现有市售重组 Art v 1 几乎全部来自大肠杆菌或毕赤酵母,无法重建其天然的脯氨酸羟化与 β-阿拉伯糖 O-糖基化。
本产品采用本氏烟草瞬时表达系统,经分泌途径完成正确的翻译后修饰推出的糖基化天然构型重组 Art v 1,面向组分诊断(CRD)试剂开发、过敏原效价标定与企业参考品、AIT 研究等场景。
一、为什么需要「糖基化」的 Art v 1
Art v 1 是蒿属(艾蒿 / 黄花蒿)花粉的主要过敏原,也是国际公认的蒿属花粉真正致敏的特异性标志物,用于区分真实致敏与交叉反应。我国北方地区蒿属花粉致敏率远高于全国平均水平,是夏秋季花粉症的首要病因;中华预防医学会《中国过敏原组分诊断专家共识》亦将"蒿"列为我国仅有的少数已开展组分诊断的过敏原之一,并明确指出制约我国 CRD 推广的首要因素是"缺乏高质量的过敏原组分试剂"。
Art v 1 是一个双结构域糖蛋白:N 端为半胱氨酸稳定的 defensin 样结构域(主要 IgE 表位所在),C 端为脯氨酸富集区,携带植物特有的两类 O-糖基化修饰——脯氨酸羟化(Hyp)及 β-L-阿拉伯呋喃糖苷,糖基部分约占天然分子量的 30–40%。
二、产品优势
- 天然构型糖基化:经分泌途径完成脯氨酸羟化与 β-阿拉伯糖 O-糖基化,SDS-PAGE 呈 24–28 kDa 双带,与天然 Art v 1 迁移特征一致。
- 无 CCD 假阳性风险:Art v 1 不含 N-糖基化位点,植物表达不会引入 β1,2-木糖 / α1,3-岩藻糖型交叉反应性碳水化合物表位。
- 正确二硫键折叠:defensin 样结构域含 4 对二硫键,植物分泌途径可完成氧化折叠,保障构象型 IgE 表位完整。
- 植物系统本底洁净:无动物源成分、低内毒素(LPS)污染风险,无哺乳动物病毒与支原体风险。
- 可深度定制:支持无标签版、黄花蒿(Artemisia annua)株同源版本、生物素/酶标记、大规格(克级)及 GMP 类似级别洽谈。
三、技术参数
| 产品名称 | 重组蒿属花粉主要过敏原 Art v 1(Art v 1.0101) |
|---|---|
| 来源物种 | Artemisia vulgaris(北艾/艾蒿);可选黄花蒿 A. annua 同源版本(定制) |
| UniProt | Q84ZX5 |
| 表达区间 | 成熟肽 Ala25–His132(108 aa) |
| 表达系统 | 本氏烟草(Nicotiana benthamiana)农杆菌介导瞬时表达 |
| 亚细胞定位 | 分泌途径 / 质外体(糖基化发生部位) |
| 翻译后修饰 | 脯氨酸羟化(Hyp)+ β-L-阿拉伯呋喃糖 O-糖基化(天然型) |
| 分子量 | 蛋白部分约 13.1 kDa;糖基化后 SDS-PAGE 呈 24–28 kDa(与天然一致) |
| 标签 | 默认 C 端 6×His(可定制无标签版) |
| 纯度 | ≥ 90%(SDS-PAGE) |
| 浓度 | 0.5–2.0 mg/mL(批特异,以 CoA 为准) |
| 缓冲液 | PBS pH 7.4;可定制 Tris 体系或冻干粉 |
| 内毒素 | < 10 EU/mg(植物系统本底极低,以实测为准) |
| 保存与稳定性 | −80 ℃ 保存 12 个月;避免反复冻融(建议分装) |
| 货期 |
预售首批 4–6 周 |
四、应用场景
- 组分诊断(CRD)试剂开发原料:蒿属花粉 sIgE 检测试剂、过敏原微阵列/蛋白芯片、化学发光与免疫印迹平台
- 过敏原效价标定与企业参考品:天然花粉提取物的组分定量、批间一致性控制(脱敏药物与 IVD 试剂质控)
- 抗体制备与筛选:免疫原、配对单抗筛选与效价评价
- AIT(过敏原免疫治疗)研究:组分疫苗、低致敏变体设计与评价
- 基础研究:致敏机制、糖基化与 IgE 表位关系、流行病学致敏谱研究
五、植物瞬转定制服务(同步开放)
除 Art v 1 外,本平台同步承接难表达过敏原与重组蛋白的植物瞬转定制表达,特别适合以下类型:
- 需要植物特异性翻译后修饰(脯氨酸羟化、Hyp-O-糖基化、阿拉伯半乳聚糖)的过敏原与糖蛋白
- 含多对二硫键、大肠杆菌易形成包涵体的蛋白(defensin 折叠、nsLTP、蛋白酶类等)
- 需要快速交付的项目:从基因到纯化蛋白典型周期 4–8 周
可提供:基因合成与密码子优化、载体构建(信号肽与亚细胞定位筛选)、沉默抑制子共表达优化、小试到百克级鲜叶放大等等。
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