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- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
microgene
- 服务名称:
重组植物凝集素定制
- 规格:
1mg
凝集素(Lectin)是糖生物学、糖蛋白组学、细胞分选与体外诊断领域不可替代的"分子探针"。但长期以来,市售凝集素几乎全部依赖天然来源提取——从刀豆、麦胚、雪花莲球茎中分离纯化。这条老路有三个绕不开的坑:
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痛点 |
具体表现 |
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批次差异大 |
活性、纯度、糖选择性随产地、季节、原料年份波动,定量实验难以复现 |
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供应不稳定 |
依赖天然资源,同工型混杂,稀有凝集素"一货难求" |
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杂质与安全性 |
天然粗提物中常混入其他凝集素同工型、蛋白酶;植物源材料亦有农残与外源污染风险 |
换到大肠杆菌表达?二硫键错配、包涵体复性、无糖基化、内毒素残留——对多数需要正确氧化折叠与亚基组装的植物凝集素而言,往往是新的麻烦。
用植物的细胞工厂,生产植物自己的蛋白,是最接近天然的那条路。
我们的方案:农杆菌介导的植物瞬时表达(Agroinfiltration)
无需建立稳定转基因株系,无需等待数月的筛选。我们把目标凝集素基因装入植物表达载体,转化农杆菌后通过注射渗透或真空渗透导入本氏烟草(Nicotiana benthamiana)叶片,4–7 天即可收获,全周期以"周"而非"月"计。
植物系统的天然适配性,正是为植物凝集素量身定做:
- 同源折叠环境:内质网氧化折叠、二硫键正确配对、多亚基组装、N-糖基化——植物凝集素天然具备的全部翻译后修饰,在植物细胞中原样发生;
- 活性经得起验证:糖结合特异性与天然凝集素保持一致,重组产物可直接替代天然提取品用于糖型分析;
- 周期短:瞬时表达 4–7 天达峰,全流程 2–4 周出蛋白;对比稳定株系数月、哺乳动物/昆虫细胞 6–9 周,时间成本大幅压缩;
- 安全性高:植物宿主低内毒素、无动物源病毒与支原体污染风险,下游纯化负担轻。
交付标准
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项目 |
标准 |
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纯度 |
SDS-PAGE ≥ 90%; |
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浓度 |
按需求定制 |
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内毒素 |
植物宿主天然低内毒素; |
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交付形式 |
液体(冰袋/干冰运输)或冻干粉; |
服务流程
- 需求沟通:提供目标凝集素的氨基酸序列 / 核酸序列 / 物种来源,以及目标用量、纯度、标签与应用场景;
- 方案报价:2个工作日内出具技术方案、周期与报价;
- 项目执行:关键节点(载体构建完成、小试结果、纯化结果)同步反馈;
典型应用场景
- 糖蛋白组学:凝集素亲和富集(LAC)用于糖肽/糖蛋白分离与质谱前处理
- 糖型分析:凝集素芯片、凝集素印迹(Lectin blot)、ELLA 检测
- 细胞与组织学:流式细胞术、免疫组化/免疫荧光的糖表型染色
- 亲和纯化填料:定制凝集素-琼脂糖树脂,用于 IgA1、糖基化病毒样颗粒等目标物分离
- 体外诊断原料:病原体糖蛋白捕获、标志物检测试剂开发
- 药物发现:抗病毒(GRFT/CV-N 类)、抗肿瘤(高甘露糖靶向)候选分子制备,Lectibody 构建
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文献和实验植物血球凝集素(PHA) phytohemagg lutinin
植物血球凝集素(PHA) phytohemagg lutinin 对原来从植物中发现的,具有凝集红血球作用的物质,而命名的,后来发现了很多具有同样作用的物质,扩大其含义为细胞凝集素中植物来源的总称——植物凝集素(phytoagglutinin,plant agglutinin)或凝集素(lectin)的同义词涵义模糊。缩写pHA的多数是指从菜豆属(Phaseolus Vulgaris)和金雀花(P.Communis)中提取的凝集素。提纯后蛋白质含量多的称为PH A-P,糖蛋白多的称为
植物源重组人胰岛素生长因子融合蛋白(OsrIGF-1),胰岛素在无血清细胞培养中的最佳替代品。 IGFs家族由两种低分子多肽(IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ)、两类特异性受体及六种结合蛋白组成。IGF-Ⅰ是一个有70个氨基酸的单链碱性蛋白,分子量7649Da,耐热。IGFs的生物学功能不只局限于有丝分裂刺激作用,它们也能诱导分化或促进分化功能的表达。全新推出的植物源重组人类胰岛素生长因子-1融合蛋白(OsrIGF-1)在IGF-1的N末端融合了人血清白蛋白(HSA),HSA作为蛋白质保护剂增加了IGF
性。 2)如果这时随机插入没有同时伴随正确重组,还会产生重组假阳性的风险,用探针 Probe1/2 可以避免假阳性,但部分模型定制服务商只采用 Probe3,所以在接受模型服务商提供的鉴定报告时注意判断所用探针位置。 3、Southern blot 探针至少需 300-500bp,对于使用小于该长度的 Donor 的小鼠模型无法进行检测 4、F0 代检测结果不能代替 F1 代鉴定结果: 有的小鼠模型鉴定报告,用 F0 代小鼠的 Southern 鉴定结果代替 F1 代鉴定结果,这种直接代替是不严谨的。 1)受精
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