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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 供应商:
上海笃玛生物科技有限公司
- 检测范围:
电询
- 检测方法:
双抗夹心法
- 应用:
科研实验
- 适应物种:
豚鼠
- 标记物:
电询
- 样本:
体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等
- 灵敏度:
电询
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1380.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1860.0 |
豚鼠(Guinea Pig)(Guinea Pig)α黑色素细胞刺激素(α-MSH)ELISA检测试剂盒
产品货号:DM-G10989
产品规格:48/96T
ELISA 检测试剂盒的检测原理
ELISA 全称酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay),是目前生物检测领域应用最广泛的免疫分析技术,该试剂盒
仅用于科研检测。
其核心总原理是:基于抗原与抗体的特异性免疫识别结合反应,耦合酶对底物的高效催化信号放大效应,将免疫结合的特异性信号转化为
可通过酶标仪定量检测的显色 / 光信号;通过固相吸附与洗涤步骤实现结合态与游离态物质的彻底分离,最终实现对待测物(抗原或抗体)
的高特异性、高灵敏度定性与定量检测。

一、ELISA 试剂盒的核心基础元件与作用
所有 ELISA 试剂盒均围绕四大核心元件构建,是实现检测的基础:
固相载体:主流为 96 孔 / 384 孔聚苯乙烯酶标板,可通过疏水作用稳定吸附蛋白类抗原 / 抗体,且不破坏其免疫活性,为免疫反应提供
固定的固相界面。
免疫核心试剂:包被用捕获抗原 / 抗体、酶标记的检测抗原 / 抗体(酶标结合物)。基于抗原表位与抗体互补决定区(CDR)的特异性结
合,是保证检测特异性的核心,可zuida程度避免交叉反应。
酶 - 底物信号系统:最常用辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(AP)。酶分子具备极高的催化效率,一个酶分子可在短时间内催化大
量底物分子生成有色产物,实现检测信号的级联放大,让 ELISA 可检测 pg/mL 甚至 fg/mL 级别的微量待测物;产物的吸光度(OD 值)
与待测物含量存在明确的剂量 - 效应关系,是定量检测的核心依据。
封闭与洗涤体系:封闭液(如 BSA、脱脂奶粉)用于覆盖酶标板上未吸附蛋白的空白位点,阻断非特异性结合,降低背景干扰;洗涤液用
于彻底分离固相结合的免疫复合物与游离的未结合物质,去除样本杂质和多余试剂,保障检测结果的准确性。
二、主流 ELISA 试剂盒的分型检测原理
根据检测靶标、分子大小与应用场景的不同,商品化 ELISA 试剂盒主要分为以下 5 种经典类型,其中双抗体夹心法、竞争法、间接法为
市场主流。
1. 双抗体夹心法(大分子抗原检测shou选,最主流)

核心适用场景:检测具有至少 2 个独立抗原表位的大分子物质,如细胞因子(IL-6、TNF-α 等)、蛋白类肿瘤标志物、病原微生物结构蛋
白、抗体药物等。





核心原理步骤:
包被固化:将针对待测抗原的特异性捕获抗体固定于酶标板孔内,洗涤去除未结合的多余抗体,封闭空白位点。
抗原捕获:加入待测样本 / 标准品,样本中的待测抗原与固相捕获抗体特异性结合,形成 “捕获抗体 - 待测抗原” 复合物,洗涤去除未结
合的样本杂质。
夹心结合:加入针对待测抗原另一独立表位的酶标记检测抗体,与复合物中的抗原结合,形成 “捕获抗体 - 待测抗原 - 酶标检测抗体” 的
双抗体夹心结构,洗涤去除未结合的酶标抗体。
显色定量:加入酶对应底物,酶催化底物发生显色反应;终止反应后,通过酶标仪测定 OD 值。显色深浅(OD 值)与样本中待测抗原的
含量呈正相关,通过标准品绘制的浓度 - OD 值标准曲线,即可计算出样本中待测抗原的精准浓度。
2. 竞争法(小分子抗原 / 半抗原检测核心方案)

核心适用场景:检测仅含单个抗原表位的小分子半抗原,如激素、农药、兽药、真菌毒素、药物残留、毒品代谢物等,也可用于部分抗体
的定量检测。

核心原理(抗原包被型,商品化试剂盒最常用):
包被固化:将待测抗原(或抗原 - 载体偶联物)固定于酶标板孔内,洗涤去除多余包被物,封闭空白位点。
竞争性结合:同时加入待测样本与固定剂量的酶标抗体,样本中游离的待测抗原,与固相板上包被的抗原,竞争性结合酶标抗体的有限结
合位点。
竞争逻辑:样本中待测抗原含量越高,能与固相包被抗原结合的酶标抗体就越少;反之,待测抗原含量越低,结合到固相上的酶标抗体就
越多。
显色定量:洗涤去除未结合的游离物质后,加入底物显色。OD 值与样本中待测抗原的含量呈负相关,通过标准曲线完成定量检测。
3. 间接法(抗体检测金标准方案)

核心适用场景:检测样本中的特异性抗体,如病原体感染抗体(乙肝、新冠病毒抗体)、自身免疫抗体、疫苗免疫后的抗体滴度检测、过
敏原特异性抗体检测等。

核心原理步骤:
包被固化:将与待测抗体对应的特异性抗原固定于酶标板孔内,洗涤去除多余抗原,封闭空白位点。
一抗结合:加入待测样本,样本中针对包被抗原的特异性抗体(一抗,即待测抗体)与固相抗原特异性结合,形成 “包被抗原 - 待测抗体
” 复合物,洗涤去除未结合的杂蛋白与非特异性抗体。
二抗结合:加入酶标记的抗种属抗体(二抗,如酶标抗人 IgG 抗体),与复合物中的待测抗体结合,洗涤去除未结合的酶标二抗。
显色判定:加入底物显色,OD 值与样本中待测抗体的含量呈正相关,既可通过临界值判定阴阳性(定性),也可通过梯度稀释实现抗体
滴度的定量检测。
4. 抗体捕获法(IgM 抗体早期感染检测专用)
核心适用场景:病原体急性感染的早期 IgM 抗体检测,如急性甲肝、新冠早期感染、优生优育 TORCH IgM 检测等,可有效排除样本中
IgG 抗体的干扰,避免假阳性。
核心原理步骤:
包被:将抗人 IgM 抗体固定于酶标板孔内,洗涤封闭后,加入待测样本,捕获样本中所有的 IgM 抗体(包括待测特异性 IgM 和非特异
性 IgM)。
抗原结合:洗涤后加入特异性抗原,仅与捕获到的待测特异性 IgM 结合。
酶标检测:加入酶标记的针对该抗原的特异性抗体,与抗原结合,再次洗涤后加入底物显色,OD 值与样本中待测特异性 IgM 抗体含量正
相关。
5. 直接法(基础原型,极少单独用于商品化试剂盒)

核心原理:将抗原包被于固相板,封闭后直接加入酶标记的特异性抗体,抗原抗体结合后洗涤、显色,OD 值与结合的酶标抗体量正相关。
特点:操作简单、步骤少、实验周期短;但需为每种检测抗体制备专属酶标物,通用性差、成本高,且非特异性干扰强,仅适用于目标抗
原含量较高的快速定性筛查、抗体特异性验证。
| 方法 | 主要检测对象 | 信息与浓度关系 | 适用分子大小 | 典型应用 |
| 双抗体夹心法 | 抗原(蛋白) | 正相关(浓度高→色深) | 大分子(多表位) | 小分子、半抗原 |
| 直接法 | 抗原 | 正相关 | 大分子 | 抗原定性、包被验证 |
| 间接法 | 抗体 | 正相关 | 抗体 | 病毒抗体、自身抗体、免疫滴度 |
| 竞争法 | 抗原(小分子) | 负相关(浓度高→色浅) | 小分子、半抗原 | 类固醇激素、药物、多肽、毒素 |
三、ELISA 技术的核心核心优势原理
高特异性:基于抗原 - 抗体的免疫识别反应,仅针对靶标分子的特定表位结合,可zuida程度规避样本中其他物质的交叉干扰。
超高灵敏度:酶的级联催化放大效应,可将微量的免疫结合信号放大百万倍,实现常规方法无法检测的超微量物质定量。
宽线性定量范围:通过标准品梯度稀释构建标准曲线,可实现多个数量级范围内的精准定量,适配不同浓度样本的检测需求。
操作标准化、通量高:96 孔板体系可实现批量样本同步检测,操作流程标准化,适配自动化设备,适合临床与大规模筛查场景。
四、试剂盒的组成

五、样本处理
1. 血清样本:采集静脉血后,室温静置2-4小时,3000rpm离心10分钟,收集上层血清,避免溶血,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
2. 血浆样本:使用抗凝管(EDTA、肝素等)采集血液,采集后立即轻轻颠倒混匀,3000rpm离心10分钟,收集上层血浆,-20℃或-80℃保存。
3. 组织培养上清:细胞培养完成后,3000rpm离心5分钟,去除细胞碎片,收集上清液,-20℃保存。
4. 细胞/组织裂解液:取适量细胞或组织样本,加入预冷的裂解液,冰浴匀浆后,4℃、12000rpm离心15分钟,收集上清液,-80℃保存。
5. 所有样本在检测前需恢复至室温,震荡混匀,若有沉淀需再次离心去除,避免影响检测结果。根据样本实际情况,可使用样本稀释液进行适当稀释,确保检测浓度落在标准曲线范围内。
六、实验步骤
1. 试剂准备:实验前将所有试剂盒组分及样本恢复至室温(25℃左右),浓缩洗涤液用蒸馏水稀释至1×工作液,浓缩检测抗体、链霉亲和素-HRP按说明书比例用样本稀释液稀释至工作液,现配现用。
2. 加样:根据实验需求确定所需板条数量,空白孔加入50μL样本稀释液,标准品孔加入50μL不同浓度的标准品工作液,待测样本孔加入50μL处理后的样本(已稀释的样本直接加入,未稀释样本可根据情况用样本稀释液1:1稀释后加入);随后向所有孔中加入50μL生物素标记检测抗体工作液,轻轻振荡混匀。
3. 孵育:盖上封板膜,置于37℃恒温箱中孵育60分钟。
4. 洗涤:小心揭开封板膜,甩去孔内液体,每孔加满1×洗涤液,静置30秒后甩去,用吸水纸拍干;重复此洗涤步骤3次,若使用洗板机,洗涤次数可增加1次。
5. 加酶:每孔加入80μL链霉亲和素-HRP工作液,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃孵育30分钟。
6. 洗涤:重复步骤4的洗涤操作,彻底去除未结合的酶结合物。
7. 显色:每孔依次加入50μL显色液A和50μL显色液B,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃避光孵育10分钟,此时阳性孔会逐渐呈现蓝色。
8. 终止:取出酶标板,迅速向每孔加入50μL终止液,轻轻振荡混匀,蓝色会立即转为黄色。
9. 检测:加入终止液后10分钟内,使用酶标仪在450nm波长处测定各孔的OD值(若需校正,可在630nm波长处测定参考OD值,最终检测OD值=450nm OD值-630nm OD值)。

七、结果计算
1. shou先计算每个标准品、空白孔及样本孔的平均OD值(复孔检测时),空白孔OD值作为阴性对照,用于扣除背景干扰。
2. 以标准品浓度为横坐标(X轴,对数坐标),对应的OD值为纵坐标(Y轴,线性坐标),使用专业绘图软件(如Excel、GraphPad Prism
)绘制标准曲线,计算回归方程(R²值应≥0.99,确保标准曲线的可靠性)。
3. 将扣除背景后的样本OD值代入回归方程,计算出样本中[检测指标]的初步浓度,再根据样本的稀释倍数计算出样本的实际浓度。

(仅供参考)
八、试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:最低检测浓度如资料所示。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
九、储存与运输
1. 试剂盒未开封时,所有组分需密封置于2~8℃冷藏保存,避免冷冻,其中标准品冻干品可置于-20℃长期保存。
2. 试剂盒开封后,预包被酶标板需密封防潮保存,剩余试剂需按原储存条件保存,避免反复冻融,开封后建议在1个月内用完。
3. 运输过程采用冷链运输(2~8℃),避免高温、剧烈震荡,确保产品性能稳定。

十、注意事项
实验前请仔细阅读本说明书,严格按照实验步骤操作,确保实验条件(温度、孵育时间)符合要求。
所有试剂使用前需充分混匀,但避免剧烈震荡产生大量泡沫,以免影响加样精度。
洗涤步骤至关重要,需确保洗涤充分,避免未结合的杂蛋白或酶结合物残留,导致背景值偏高。
显色反应需避光进行,终止液加入后应立即检测OD值,避免放置时间过长导致颜色消退,影响检测结果。
实验所用样本、试剂及废弃物均需按生物安全规范处理,避免交叉污染。
本试剂盒仅用于科研用途,不用于临床诊断。
十一、售后服务


上海笃玛生物科技有限公司拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,
请及时联系我们的技术顾问,我们将在24小时内响应,为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。
豚鼠(Guinea Pig)L选择素(SELL)ELISA检测试剂盒
产品货号:DM-G10961
产品规格:48/96T
ELISA 检测试剂盒的检测原理
ELISA 全称酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay),是目前生物检测领域应用最广泛的免疫分析技术,该试剂盒
仅用于科研检测。
其核心总原理是:基于抗原与抗体的特异性免疫识别结合反应,耦合酶对底物的高效催化信号放大效应,将免疫结合的特异性信号转化为
可通过酶标仪定量检测的显色 / 光信号;通过固相吸附与洗涤步骤实现结合态与游离态物质的彻底分离,最终实现对待测物(抗原或抗体)
的高特异性、高灵敏度定性与定量检测。

一、ELISA 试剂盒的核心基础元件与作用
所有 ELISA 试剂盒均围绕四大核心元件构建,是实现检测的基础:
固相载体:主流为 96 孔 / 384 孔聚苯乙烯酶标板,可通过疏水作用稳定吸附蛋白类抗原 / 抗体,且不破坏其免疫活性,为免疫反应提供
固定的固相界面。
免疫核心试剂:包被用捕获抗原 / 抗体、酶标记的检测抗原 / 抗体(酶标结合物)。基于抗原表位与抗体互补决定区(CDR)的特异性结
合,是保证检测特异性的核心,可zuida程度避免交叉反应。
酶 - 底物信号系统:最常用辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(AP)。酶分子具备极高的催化效率,一个酶分子可在短时间内催化大
量底物分子生成有色产物,实现检测信号的级联放大,让 ELISA 可检测 pg/mL 甚至 fg/mL 级别的微量待测物;产物的吸光度(OD 值)
与待测物含量存在明确的剂量 - 效应关系,是定量检测的核心依据。
封闭与洗涤体系:封闭液(如 BSA、脱脂奶粉)用于覆盖酶标板上未吸附蛋白的空白位点,阻断非特异性结合,降低背景干扰;洗涤液用
于彻底分离固相结合的免疫复合物与游离的未结合物质,去除样本杂质和多余试剂,保障检测结果的准确性。
二、主流 ELISA 试剂盒的分型检测原理
根据检测靶标、分子大小与应用场景的不同,商品化 ELISA 试剂盒主要分为以下 5 种经典类型,其中双抗体夹心法、竞争法、间接法为
市场主流。
1. 双抗体夹心法(大分子抗原检测shou选,最主流)

核心适用场景:检测具有至少 2 个独立抗原表位的大分子物质,如细胞因子(IL-6、TNF-α 等)、蛋白类肿瘤标志物、病原微生物结构蛋
白、抗体药物等。





核心原理步骤:
包被固化:将针对待测抗原的特异性捕获抗体固定于酶标板孔内,洗涤去除未结合的多余抗体,封闭空白位点。
抗原捕获:加入待测样本 / 标准品,样本中的待测抗原与固相捕获抗体特异性结合,形成 “捕获抗体 - 待测抗原” 复合物,洗涤去除未结
合的样本杂质。
夹心结合:加入针对待测抗原另一独立表位的酶标记检测抗体,与复合物中的抗原结合,形成 “捕获抗体 - 待测抗原 - 酶标检测抗体” 的
双抗体夹心结构,洗涤去除未结合的酶标抗体。
显色定量:加入酶对应底物,酶催化底物发生显色反应;终止反应后,通过酶标仪测定 OD 值。显色深浅(OD 值)与样本中待测抗原的
含量呈正相关,通过标准品绘制的浓度 - OD 值标准曲线,即可计算出样本中待测抗原的精准浓度。
2. 竞争法(小分子抗原 / 半抗原检测核心方案)

核心适用场景:检测仅含单个抗原表位的小分子半抗原,如激素、农药、兽药、真菌毒素、药物残留、毒品代谢物等,也可用于部分抗体
的定量检测。

核心原理(抗原包被型,商品化试剂盒最常用):
包被固化:将待测抗原(或抗原 - 载体偶联物)固定于酶标板孔内,洗涤去除多余包被物,封闭空白位点。
竞争性结合:同时加入待测样本与固定剂量的酶标抗体,样本中游离的待测抗原,与固相板上包被的抗原,竞争性结合酶标抗体的有限结
合位点。
竞争逻辑:样本中待测抗原含量越高,能与固相包被抗原结合的酶标抗体就越少;反之,待测抗原含量越低,结合到固相上的酶标抗体就
越多。
显色定量:洗涤去除未结合的游离物质后,加入底物显色。OD 值与样本中待测抗原的含量呈负相关,通过标准曲线完成定量检测。
3. 间接法(抗体检测金标准方案)

核心适用场景:检测样本中的特异性抗体,如病原体感染抗体(乙肝、新冠病毒抗体)、自身免疫抗体、疫苗免疫后的抗体滴度检测、过
敏原特异性抗体检测等。

核心原理步骤:
包被固化:将与待测抗体对应的特异性抗原固定于酶标板孔内,洗涤去除多余抗原,封闭空白位点。
一抗结合:加入待测样本,样本中针对包被抗原的特异性抗体(一抗,即待测抗体)与固相抗原特异性结合,形成 “包被抗原 - 待测抗体
” 复合物,洗涤去除未结合的杂蛋白与非特异性抗体。
二抗结合:加入酶标记的抗种属抗体(二抗,如酶标抗人 IgG 抗体),与复合物中的待测抗体结合,洗涤去除未结合的酶标二抗。
显色判定:加入底物显色,OD 值与样本中待测抗体的含量呈正相关,既可通过临界值判定阴阳性(定性),也可通过梯度稀释实现抗体
滴度的定量检测。
4. 抗体捕获法(IgM 抗体早期感染检测专用)
核心适用场景:病原体急性感染的早期 IgM 抗体检测,如急性甲肝、新冠早期感染、优生优育 TORCH IgM 检测等,可有效排除样本中
IgG 抗体的干扰,避免假阳性。
核心原理步骤:
包被:将抗人 IgM 抗体固定于酶标板孔内,洗涤封闭后,加入待测样本,捕获样本中所有的 IgM 抗体(包括待测特异性 IgM 和非特异
性 IgM)。
抗原结合:洗涤后加入特异性抗原,仅与捕获到的待测特异性 IgM 结合。
酶标检测:加入酶标记的针对该抗原的特异性抗体,与抗原结合,再次洗涤后加入底物显色,OD 值与样本中待测特异性 IgM 抗体含量正
相关。
5. 直接法(基础原型,极少单独用于商品化试剂盒)

核心原理:将抗原包被于固相板,封闭后直接加入酶标记的特异性抗体,抗原抗体结合后洗涤、显色,OD 值与结合的酶标抗体量正相关。
特点:操作简单、步骤少、实验周期短;但需为每种检测抗体制备专属酶标物,通用性差、成本高,且非特异性干扰强,仅适用于目标抗
原含量较高的快速定性筛查、抗体特异性验证。
| 方法 | 主要检测对象 | 信息与浓度关系 | 适用分子大小 | 典型应用 |
| 双抗体夹心法 | 抗原(蛋白) | 正相关(浓度高→色深) | 大分子(多表位) | 小分子、半抗原 |
| 直接法 | 抗原 | 正相关 | 大分子 | 抗原定性、包被验证 |
| 间接法 | 抗体 | 正相关 | 抗体 | 病毒抗体、自身抗体、免疫滴度 |
| 竞争法 | 抗原(小分子) | 负相关(浓度高→色浅) | 小分子、半抗原 | 类固醇激素、药物、多肽、毒素 |
三、ELISA 技术的核心核心优势原理
高特异性:基于抗原 - 抗体的免疫识别反应,仅针对靶标分子的特定表位结合,可zuida程度规避样本中其他物质的交叉干扰。
超高灵敏度:酶的级联催化放大效应,可将微量的免疫结合信号放大百万倍,实现常规方法无法检测的超微量物质定量。
宽线性定量范围:通过标准品梯度稀释构建标准曲线,可实现多个数量级范围内的精准定量,适配不同浓度样本的检测需求。
操作标准化、通量高:96 孔板体系可实现批量样本同步检测,操作流程标准化,适配自动化设备,适合临床与大规模筛查场景。
四、试剂盒的组成

五、样本处理
1. 血清样本:采集静脉血后,室温静置2-4小时,3000rpm离心10分钟,收集上层血清,避免溶血,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
2. 血浆样本:使用抗凝管(EDTA、肝素等)采集血液,采集后立即轻轻颠倒混匀,3000rpm离心10分钟,收集上层血浆,-20℃或-80℃保存。
3. 组织培养上清:细胞培养完成后,3000rpm离心5分钟,去除细胞碎片,收集上清液,-20℃保存。
4. 细胞/组织裂解液:取适量细胞或组织样本,加入预冷的裂解液,冰浴匀浆后,4℃、12000rpm离心15分钟,收集上清液,-80℃保存。
5. 所有样本在检测前需恢复至室温,震荡混匀,若有沉淀需再次离心去除,避免影响检测结果。根据样本实际情况,可使用样本稀释液进行适当稀释,确保检测浓度落在标准曲线范围内。
六、实验步骤
1. 试剂准备:实验前将所有试剂盒组分及样本恢复至室温(25℃左右),浓缩洗涤液用蒸馏水稀释至1×工作液,浓缩检测抗体、链霉亲和素-HRP按说明书比例用样本稀释液稀释至工作液,现配现用。
2. 加样:根据实验需求确定所需板条数量,空白孔加入50μL样本稀释液,标准品孔加入50μL不同浓度的标准品工作液,待测样本孔加入50μL处理后的样本(已稀释的样本直接加入,未稀释样本可根据情况用样本稀释液1:1稀释后加入);随后向所有孔中加入50μL生物素标记检测抗体工作液,轻轻振荡混匀。
3. 孵育:盖上封板膜,置于37℃恒温箱中孵育60分钟。
4. 洗涤:小心揭开封板膜,甩去孔内液体,每孔加满1×洗涤液,静置30秒后甩去,用吸水纸拍干;重复此洗涤步骤3次,若使用洗板机,洗涤次数可增加1次。
5. 加酶:每孔加入80μL链霉亲和素-HRP工作液,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃孵育30分钟。
6. 洗涤:重复步骤4的洗涤操作,彻底去除未结合的酶结合物。
7. 显色:每孔依次加入50μL显色液A和50μL显色液B,轻轻振荡混匀,盖上封板膜,37℃避光孵育10分钟,此时阳性孔会逐渐呈现蓝色。
8. 终止:取出酶标板,迅速向每孔加入50μL终止液,轻轻振荡混匀,蓝色会立即转为黄色。
9. 检测:加入终止液后10分钟内,使用酶标仪在450nm波长处测定各孔的OD值(若需校正,可在630nm波长处测定参考OD值,最终检测OD值=450nm OD值-630nm OD值)。

七、结果计算
1. shou先计算每个标准品、空白孔及样本孔的平均OD值(复孔检测时),空白孔OD值作为阴性对照,用于扣除背景干扰。
2. 以标准品浓度为横坐标(X轴,对数坐标),对应的OD值为纵坐标(Y轴,线性坐标),使用专业绘图软件(如Excel、GraphPad Prism
)绘制标准曲线,计算回归方程(R²值应≥0.99,确保标准曲线的可靠性)。
3. 将扣除背景后的样本OD值代入回归方程,计算出样本中[检测指标]的初步浓度,再根据样本的稀释倍数计算出样本的实际浓度。

(仅供参考)
八、试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:最低检测浓度如资料所示。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
九、储存与运输
1. 试剂盒未开封时,所有组分需密封置于2~8℃冷藏保存,避免冷冻,其中标准品冻干品可置于-20℃长期保存。
2. 试剂盒开封后,预包被酶标板需密封防潮保存,剩余试剂需按原储存条件保存,避免反复冻融,开封后建议在1个月内用完。
3. 运输过程采用冷链运输(2~8℃),避免高温、剧烈震荡,确保产品性能稳定。

十、注意事项
实验前请仔细阅读本说明书,严格按照实验步骤操作,确保实验条件(温度、孵育时间)符合要求。
所有试剂使用前需充分混匀,但避免剧烈震荡产生大量泡沫,以免影响加样精度。
洗涤步骤至关重要,需确保洗涤充分,避免未结合的杂蛋白或酶结合物残留,导致背景值偏高。
显色反应需避光进行,终止液加入后应立即检测OD值,避免放置时间过长导致颜色消退,影响检测结果。
实验所用样本、试剂及废弃物均需按生物安全规范处理,避免交叉污染。
本试剂盒仅用于科研用途,不用于临床诊断。
十一、售后服务


上海笃玛生物科技有限公司拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,
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风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
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