- ￥8000
- 上海淳麦
- 上海
- SHA-KO-0182
- 2026年09月07日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
mCcr5基因敲除株（BV2细胞）
- 库存：
10000
- 供应商：
上海淳麦
- 组织来源：
脑
- 物种来源：
小鼠
- 器官来源：
脑
- 生长状态：
贴壁生长
- 规格：
T25/冻存管
一、产品概述
mCcr5基因敲除株（BV2细胞） 是 上海淳麦生物科技有限公司 构建的 Ccr5 基因敲除稳转细胞株，宿主/载体细胞为 BV2。该产品基于 "Ccr5 功能研究" 需求定向构建，即购即用，可显著缩短研究者自行构建基因编辑细胞株的周期（常规自建需 2-4 个月）。
二、产品名称与长尾关键词
核心检索词：Ccr5 基因敲除细胞株、Ccr5 knockout cell line、BV2 Ccr5 KO、Ccr5 稳转细胞、CRISPR Ccr5 基因敲除、Ccr5 功能研究模型。
三、核心参数
| 产品名称 | mCcr5基因敲除株（BV2细胞） |
| 商品货号 | SHA-KO-0182 |
| 品牌 | 上海淳麦 |
| 细胞规格 | T25/冻存管 |
| 种属来源 | 小鼠 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 组织来源 | 脑 |
| 器官来源 | 脑 |
| 宿主/载体细胞 | BV2 |
| 产地 | 上海 |
| 供应商 | 上海淳麦生物科技有限公司 |
四、产品特点
- Ccr5 靶向基因敲除，构建与鉴定围绕该基因位点展开
- 以 BV2 为宿主背景，便于在熟悉细胞体系中开展机制研究
- 组织来源 脑，适配相应组织背景的功能与机制研究
- 冻存管规格发货，复苏后即可进入实验，便于批次管理与保种
- 冻存管/培养瓶两种规格可选，适配不同实验通量
- 单克隆来源，敲除等位基因经 PCR 扩增与 Sanger 测序鉴定
- 可与同靶点过表达株配对使用，构建功能回补实验体系
五、适用范围
本 Ccr5 基因敲除稳转细胞株主要用于 Ccr5 基因功能缺失（loss-of-function）研究，通过表型对比解析 Ccr5 的生物学功能与调控机制；适用于 rescue 回补实验（回补野生型验证表型归因）、信号通路解析、药物靶点确证与慢病毒包装等场景。宿主细胞 BV2 便于在熟悉背景下开展机制研究。
六、构建与验证原理
本 Ccr5 敲除株（货号 SHA-KO-0182）通过 CRISPR/Cas9 介导的基因组编辑构建：sgRNA 引导 Cas9 在 Ccr5 位点切割，NHEJ 修复引入 indel 造成移码与功能缺失。阳性克隆以靶位点 PCR + 测序方式确认基因型，并在 BV2 细胞中连续传代考察敲除表型的遗传稳定性。
七、细胞培养方案建议
1. 复苏：冻存管自液氮取出后立即置 37℃ 水浴快速解冻（约 1–2 分钟，至仅余少量冰晶），75% 酒精擦拭管口，将悬液转入含预温完全培养基的离心管，100×g 离心 5 分钟去除冻存保护剂（DMSO），弃上清后重悬并接种于 T25 培养瓶（BV2 建议 1–3×10⁵ cells/cm²），置 37℃、5% CO₂、饱和湿度培养箱。
2. 培养条件：完全培养基建议含 10% FBS，BV2 细胞每 2–3 天换液，换液时保留部分条件培养基有助于细胞适应，具体血清比例可按细胞状态在 5%–10% 间调整。
3. 传代：BV2 贴壁株建议汇合度 80%–90% 时传代：PBS 洗涤、0.25% 胰酶 37℃ 消化 1–3 分钟，镜下确认变圆脱壁后以完全培养基终止，离心去酶液，按 1:3–1:6 比例接种；对消化敏感的细胞可采用低浓度胰酶或室温消化。
4. 倍增与接种：BV2 常规每 2–4 天传代一次，具体依倍增时间（多数 18–48 小时）与接种密度调整；长期过度汇合会改变细胞形态与基因表达谱，应及时分瓶。
5. 冻存：冻存前确保细胞处于对数期且无污染，按 1–3×10⁶ cells/mL 重悬于含 10% DMSO 的冻存液，分装后程序降温过夜再转入液氮；标注 Ccr5 基因敲除株、代次与日期便于追溯。
6. 状态复核：连续传代 5–10 代后建议复核 Ccr5 的基因敲除状态（敲除株以 PCR/测序、过表达株以 qPCR/WB），确认 BV2 细胞中目标位点/表达水平未发生漂变。
八、保存与运输
Ccr5 基因敲除稳转株以冻存管发出（货号 SHA-KO-0182，T25/冻存管）。冻存管收到后若暂不复苏，应立即转入液氮保存，切勿在 -20℃ 或 4℃ 长时间放置；运输全程干冰冷链，签收后请核对细胞状态并及时处理；BV2 细胞对温度波动较敏感，建议到货当日完成复苏或入库。
九、常见问题（FAQ）
- Ccr5 敲除后是否完全无蛋白表达？
CRISPR/Cas9 移码敲除通常导致功能蛋白缺失，但需以 Western blot 在本实验体系中实测确认；建议用识别不同表位的抗体验证 Ccr5 蛋白水平，并关注是否存在截短产物。 - Ccr5 敲除株的脱靶风险如何评估？
建议对预测的高风险脱靶位点进行 PCR 测序排查，或采用多个独立克隆比较表型一致性；如条件允许，可结合 rescue 实验进一步排除脱靶影响。 - 收到后发现细胞状态不佳怎么办？
请先核对运输包装与到货温度，拍照留存并尽快联系售后；同时按复苏方案处理，避免长时间置于非适宜温度。 - 复苏后细胞不贴壁或大量死亡？
多为冻存损伤或 DMSO 毒性所致，建议提高接种密度（1–3×10⁵ cells/cm²）、缩短水浴时间、充分离心去除 DMSO；若持续不贴壁，排查支原体污染或血清批次适配性。 - 是否提供培养基与转染试剂配套？
本产品为细胞株，配套完全培养基、冻存液、支原体检测试剂与转染试剂可另行采购（见相关产品推荐）。
十、相关产品推荐
· Ccr5 基因过表达稳转株（功能回补对照）
· Ccr5 靶向 sgRNA / 同源重组修复模板
· 野生型 BV2 细胞株（阴性对照）
· Ccr5 相关抗体与 ELISA 试剂盒（检测表达/功能）
· 慢病毒包装用 293T 工具细胞
十一、产品质控与售后
关于 Ccr5 基因敲除株（BV2，货号 SHA-KO-0182）：敲除株随货说明包含靶位点扩增与测序结果，便于研究者自行复核基因型，随货技术资料载明鉴定方法与判读标准。产品科研专用；运输保温、收货复苏与售后时效按平台规则执行，具体疑问可联系售后咨询。
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文献和实验之降解，是在 RNA 水平上的降低目的基因的表达。此时，基因敲除稳转株可以很大程度上规避这个问题。因为基因敲除稳转株是在基因组水平上通过基因序列的改变使其基因功能丧失，在敲除细胞中通常不会检测到靶蛋白的表达，而且敲除效果稳定，不能恢复，也就是永久性敲除了。但是基因敲除稳转株缺点是操作周期长，费用多，效率低。如何选择基因下调表达的方式，就要综合考虑了。那么同样是稳定株，单克隆？混合克隆？要怎么选？细胞：当需要去除细胞群体干扰因素的时候，推荐使用单克隆稳定细胞株，其基因组背景相对单一，对实验
activation mediator) 哦~~ 有时候，我们想知道基因产物定位怎么办？融合标签啊！怎么融合？同源重组修复能帮到你！Cas9 引入双链 DNA 断裂，同源介导修复（HDR）就能帮你把转进细胞的同源片段插入切割位点上！如果你转入细胞的同源片段包含荧光标签，几天过后你的细胞就可以亮了！如果你转入细胞的同源片段包含点突变，duang！一个目的基因突变细胞株也就这么构建成了！ 这只是 Cas9 技术的冰山一角，更多技术等待着你去了解，更更多的应用也等待着你去开发！
目前慢病毒载体主要应用在以下几个方面： 细胞基因治疗（截止目前，已上市的 CAR-T 产品有 9 款采用了慢病毒载体递送 CAR 基因） 基因表达调控（过表达、RNA 干扰研究等） 基因编辑（CRlSPR/Cas9 gRNA 文库筛选、基因敲除、敲入、点突变、基因激活/抑制） 稳转细胞株构建 活体细胞成像追踪 转基因动物 图 1 慢病毒载体的主要应用方向 应用案例 案例 1：用慢病毒载体进行基因过表达，构建稳转细胞株，研究葡萄糖激酶在前列腺癌（PCa）中的作用[1] 细胞
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