RTL9基因敲除细胞株

RTL9基因敲除细胞株核心优势
1、高效基因编辑：双sgRNA策略，敲除效率>90%
2、多癌种覆盖：18种标准化肿瘤细胞模型（下表）
3、 严格质控：STR鉴定、支原体检测、测序验证
4、快速交付：现货细胞5个工作日内发货，定制服务6-8周

可选细胞系列表
编号    细胞系名称    细胞类型描述    适用研究领域
1    A549    人非小细胞肺癌细胞    肺癌表观遗传调控研究
2    THP1    人单核细胞白血病细胞    白血病分化机制研究
3    HepG2    人肝癌细胞    肝脏肿瘤表观遗传修饰
4    HCT116    人结肠癌细胞    结直肠癌发生机制
5    Hela    人宫颈癌细胞    HPV相关肿瘤研究
6    PC3    人前列腺癌细胞    雄激素非依赖性前列腺癌
7    PANC1    人胰腺癌细胞    胰腺癌耐药性研究
8    A375    人恶性黑色素瘤细胞    黑色素瘤转移机制
9    U251MG    人胶质瘤细胞    神经胶质瘤治疗靶点
10    Raji    人伯基茨淋巴瘤细胞    B细胞淋巴瘤研究
11    HGC27    人胃癌细胞    胃癌表观遗传改变
12    MCF7    人乳腺癌细胞    乳腺癌激素调控
13    U87MG    人脑星形胶质母细胞瘤细胞    脑肿瘤干细胞特性
14    K562    人慢性髓原白血病细胞    造血系统恶性肿瘤
15    JURKAT    人T淋巴细胞白血病细胞    T细胞白血病免疫治疗
16    SKNAS    人神经母细胞瘤细胞    儿童神经肿瘤模型
17    U2OS    人骨肉瘤细胞    骨肿瘤微环境研究
18    SKOV3    人卵巢癌细胞    卵巢癌转移机制

技术参数
参数             规格
编辑技术     CRISPR-Cas9（双sgRNA靶向）
验证方法            Sanger测序 + Western Blot
敲除效率             >90%（测序验证）
脱靶率           <0.1%（全基因组脱靶分析）
传代稳定性    ≥15代（基因型稳定）

RTL9基因敲除细胞株细胞培养步骤：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，
弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。
第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，
若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；
将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，
换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。