信天翁GOONIE 细胞总RNA快速提取试剂盒

本试剂盒适用于从约1×10^6个细胞中快速提取高质量的大于200nt的总RNA。采用独特的裂解体系，能迅速裂解生物样品并失活RNA酶，确保RNA提取的完整性。不使用苯F、氯仿等有毒物质，所提RNA产量大、纯度高，适用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern杂交、cDNA文库、微阵列分析、测序等多种下游实验。

核心优势

1. 8分钟快速提取

从样本裂解到RNA洗脱，8分钟即可完成高纯度RNA提取，适合多样本通量场景，显著提升实验效率。

2. 0苯F0氯仿，无毒配方

不使用苯F、氯仿等有毒试剂，全程室温操作，减少对实验人员的健康危害，废液处理也更简单。有客户反馈原来使用Trizol类试剂“太毒了”而希望更换，改用本试剂盒后在Jurkat细胞提取上从3小时缩短至约40分钟。

3. 室温操作，无需低温离心

整个提取过程在室温（15-25℃）进行，无需提前预冷试剂或低温离心，简化操作流程，降低设备要求。

4. 高纯度，适配多种下游

提取RNA A260/280通常落在2.0~2.2，A260/230多数样本>2.0，可直接用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern杂交、cDNA文库、微阵列分析、RNA-seq等多种下游实验。已有多篇客户文献使用本产品RNA送Azenta、Illumina等平台测序。

性能实测数据

以下为厂家自测+客户回传数据（信息已脱敏），样本已覆盖上百种细胞类型：

293F细胞（5×10^5）RNA提取琼脂糖凝胶电泳结果，28S/18S条带清晰

纯度表现（A260/280）：多数样本落在2.0~2.2区间；HTR-8滋养层细胞实测A260/280=2.24、A260/230=2.46。

浓度表现：内皮细胞2×10^6/样最高3152.9 ng/μL；293T六孔板长满1841.8~1969.9 ng/μL（5个平行样一致性良好）；肝肿瘤细胞1488.8 ng/μL；CHO细胞3.5×10^6/样1940.6 ng/μL。

下游验证：提取RNA已成功用于RT-qPCR、琼脂糖凝胶电泳、RNA-seq等下游实验，多篇客户文献送Azenta、Illumina等平台测序（见“文献引用”板块）。

客户实验室实测反馈

以下数据均来自客户使用GOONIE 400-100后回传的真实实验结果（信息已脱敏），样本已覆盖上百种细胞类型。

① 常规细胞系：高浓度、高纯度

内皮细胞（2×10^6 细胞/样）

RNA浓度最高达 3152.9 ng/μL，A260/280 为 2.17~2.19。

纯度表现（A260/280）：多数样本落在2.0~2.2区间；HTR-8滋养层细胞实测A260/280=2.24、A260/230=2.46。

浓度表现：内皮细胞2×10^6/样最高3152.9 ng/μL；293T六孔板长满1841.8~1969.9 ng/μL（5个平行样一致性良好）；肝肿瘤细胞1488.8 ng/μL；CHO细胞3.5×10^6/样1940.6 ng/μL。

下游验证：提取RNA已成功用于RT-qPCR、琼脂糖凝胶电泳、RNA-seq等下游实验，多篇客户文献送Azenta、Illumina等平台测序（见“文献引用”板块）。

客户实验室实测反馈

以下数据均来自客户使用GOONIE 400-100后回传的真实实验结果（信息已脱敏），样本已覆盖上百种细胞类型。

① 常规细胞系：高浓度、高纯度

内皮细胞（2×10^6 细胞/样）

RNA浓度最高达 3152.9 ng/μL，A260/280 为 2.17~2.19。

93T细胞（六孔板长满，5个平行样）

浓度 1841.8~1969.9 ng/μL，A260/280 均在 2.08~2.10，批间一致性好；客户在20万、100万细胞量下同样获得稳定结果。

肝肿瘤细胞（六孔板（未计数））

RNA浓度 1488.8 ng/μL，A260/280 为 2.00。

胃和胰腺正常上皮细胞（六孔板）

2个样本浓度 1414.7、1096.1 ng/μL，A260/280 为 2.07、2.06。

HTR-8滋养层细胞（六孔板2孔合并，洗脱约20μL）

浓度 939.1 ng/μL，A260/280 为 2.08、A260/230 为 2.25，两项纯度指标均表现优秀。

内膜癌细胞（六孔板70%密度）

浓度 424.9~945.4 ng/μL，A260/280 为 2.12，客户评价“浓度、纯度都好”。

HUVEC人脐静脉内皮细胞（六孔板汇合80%，3孔合并过2柱）

RNA浓度 400~800 ng/μL 区间，客户反馈“浓度跟之前用的试剂盒差不多，提得挺好的，速度也快”。

② 原代细胞与难提样本

CHO细胞（3.5×10^6 细胞/样）

RNA浓度 1940.6 ng/μL，A260/280 为 2.3。

SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞（60mm中皿，密度80%）

RNA浓度 507 ng/μL，A260/280 为 2.06，客户反馈“总体来说很方便快速”。

BMDM原代巨噬细胞（60mm皿密度50%，1mL裂解液）

RNA浓度 507.9 ng/μL，A260/280 为 2.11。

大鼠软骨细胞（12孔板，NC+4个药物处理组）

NC组 454.3 ng/μL，4个药物处理组 205.4~257.6 ng/μL，A260/280 为 2.09~2.13。该药物本身具有抑制RNA合成的作用，处理组浓度下降符合预期，各组RNA仍可稳定支持下游检测。

小鼠BV2小胶质细胞（六孔板长满）

客户反馈“浓度高，纯度好，下游实验溶解曲线正常，重复性也挺好”；RAW264.7巨噬细胞在 130万~250万/孔 的细胞量梯度下均提取成功。

③ 客户同步对比

速度对比｜Jurkat悬浮细胞：客户同步对比传统提取试剂，传统试剂全程用时至少3小时，使用GOONIE试剂盒约40分钟即完成提取，且无需苯F、氯仿等有毒试剂。也有客户明确反馈，原来使用Trizol类试剂正是因为“太毒了”而希望更换。

纯度对比｜同批THP-1诱导巨噬细胞：客户在同一批样本上对比传统Trizol法，Trizol所得RNA浓度略高一点，但纯度指标不如GOONIE试剂盒；在Th17细胞样本上，传统Trizol法所得RNA的A260/280、A260/230均低于1.6，纯度不理想。

低本底免疫细胞：对于RNA含量本底较低的免疫细胞，也有客户反馈浓度虽然不算高，但RT-qPCR扩增曲线正常、Ct值可用——少量样本优先选择qPCR等灵敏度高的下游方法即可。

客户实测数据汇总（节选）

样本类型	样本量/培养条件	RNA浓度(ng/μL)	A260/280
内皮细胞	2×10^6/样	最高3152.9	2.17~2.19
CHO细胞	3.5×10^6/样	1940.6	2.06
293T细胞	六孔板长满，5平行	1841.8~1969.9	2.08~2.10
肝肿瘤细胞	六孔板	1488.8	2.00
胃和胰腺正常上皮	六孔板	1096.1~1414.7	2.06~2.07
气道基底干细胞(未分化)	冻存细胞	900以上	2.19
HTR-8滋养层	六孔板2孔合并，洗脱20μL	878.6	2.24
内膜癌	六孔板70%，7样	764.9~966.2	2.12~2.18
HUVEC	六孔板80%，3孔合并2柱	约400~800	2.1
HCT116	—	829.5	2.15
BMDM原代巨噬	60mm皿50%，1mL裂解液	507.9	2.11
SH-SY5Y神经细胞	60mm中皿80%	507	2.06
大鼠软骨(NC+药物梯度)	12孔板	205.4~454.3	2.09~2.13
RAW264.7巨噬(梯度)	130万~250万/孔	各梯度均成功	—
HCT116(转染后24h)	25万铺板	约219~236	2.05~2.19
A549	六孔板80%	329.4	2.11
人血白细胞	5mL全血分离	284.7	—

客户反馈摘录：“提的挺好的，速度也快。”——HUVEC用户；“总体来说很方便快速。”——SH-SY5Y用户；“浓度高，纯度好，下游实验溶解曲线正常，重复性也挺好的。”——BV2用户

注：以上为不同客户实验室的回传数据，样本培养条件、细胞状态与洗脱体积存在差异，浓度数值仅供参考。此外，也有客户将本试剂盒探索用于秀丽隐杆线虫、斑马鱼胚胎/幼鱼、蚜虫等微小模式生物样本并获得可用结果。

8分钟操作流程

从细胞收集到RNA洗脱，仅需8分钟。请对照上方操作演示视频（时长1分21秒）与以下关键节点操作：

关键操作节点

裂解：每1×10^6细胞加入裂解液，充分吹打混匀，室温裂解；对于贴壁细胞，可直接在培养板中加入裂解液裂解。

乙醇混合：加入等体积无水乙醇，充分混匀后转入RNA纯化柱。

洗涤：Wash Buffer洗涤后充分甩干，确认乙醇挥发后再进行下一步。

洗脱：Elution Buffer不少于20μL，加在膜中央勿碰侧壁，可重复洗脱一次提高产量。

适用样本与下游应用

适用样本量建议

细胞类型	建议样本量	备注
常规贴壁细胞（HEK293、A549、HepG2等）	1×10^5 ~ 2×10^6	不确定时先试1×10^6
低RNA含量细胞（T/B、NK、PBMC、Th17、Jurkat等）	1×10^6 ~ 3×10^6	建议加大细胞量
珍稀细胞（≤1000个）	≥5万（最低）	低于5万建议用500-103/500-106

贴壁细胞密度建议：12孔板70%以上密度、6孔板40%左右密度效果较好。若6孔板细胞密度≥60%，建议在板中加入1mL Lysis Buffer裂解后，加入等体积无水乙醇，分2个离心柱按说明书操作。

下游实验适配：RT-PCR、RT-qPCR、Northern杂交、cDNA文库构建、微阵列分析、RNA-seq。测序公司对溶剂有要求时可将Elution Buffer换成无酶水。客户实测已成功送Azenta、Illumina等平台测序。

珍稀细胞联动：样本量极少的珍稀细胞可选择RNAflash™ DCA 1-step RT qPCR（SYBR Green）kit（500-103）或RNAflash™ DCA 2-step RT qPCR（probe）kit（500-106），最少支持10个细胞直扩，一次实验测完Ct值。

常见问题 FAQ

Q：是否能提小片段RNA，如miRNA？

A：本试剂盒（400-100）提取大于200nt的总RNA，不包含miRNA等200nt以下的小片段RNA。若需提取miRNA等小片段RNA，建议选用miRNA专用提取试剂盒，可针对性回收200nt以下的小片段RNA。

Q：提取后的总RNA是否可以用于测序分析？

A：是。已有多篇客户文献使用本产品RNA送测序（含Azenta、Illumina等平台），测序公司对溶剂有要求时可将Elution Buffer换成无酶水。

Q：提取的RNA可以用于哪些下游实验？

A：RT-PCR、RT-qPCR、Northern杂交、cDNA文库构建和微阵列分析等。

Q：试剂盒保质期有多久？

A：两年（出厂质检 品质保障）。

Q：是否可以用于提取少量样本的RNA？

A：建议样本量不少于5万个细胞。对于T/B、NK、PBMC、Th17等低RNA含量细胞，建议1×10^6~3×10^6细胞量；细胞量过少时优先选择qPCR等灵敏度高的下游方法。

Q：提取的RNA用于测序，Elution Buffer需不需要换成无酶水？

A：视测序公司要求。若测序公司对溶剂有要求，可换无酶水。

Q：逆转录前是否需要gDNA去除？

A：一般来说没有大量gDNA污染。但逆转录前均建议采用DNA酶处理以保证RNA纯净（推荐使用逆转录试剂盒500-101含gDNA去除酶）。

Q：提取的RNA浓度很低，可能是什么原因？

A：主要原因：①细胞量不足（96孔板、25万以下细胞量建议换用更大孔板或合并样本）；②低RNA含量细胞用量不够（T/B、NK、PBMC、Th17等免疫细胞建议1×10^6~3×10^6）；③细胞量过多导致裂解不充分（单柱建议1~2百万细胞）；④洗脱不充分（洗脱液不少于20μL、加在膜中央勿碰侧壁，可重复洗脱一次）。④裂解后忘记加入无水乙醇混匀再上柱，或Wash buffer内没有加入无水乙醇就使用。

Q：A260/230偏低或纯度不理想怎么办？

A：Wash Buffer首次使用前请确认已加入45mL无水乙醇（建议使用新鲜无水乙醇）；洗涤后充分甩干并适当晾干，确认乙醇挥发后再洗脱。贴壁过紧、黏连过紧的细胞建议胰酶消化充分、吹打均匀后再裂解。

Q：转染后或药物处理后的细胞能提取吗？

A：可以。客户实测：25万铺板转染24小时后收样，RNA浓度约220ng/μL以上、A260/280为2.05~2.19；部分药物梯度实验中处理组浓度与NC组相比有浮动属正常。病毒转染后建议适当增加收样细胞量。

Q：RNA浓度不高，下游实验还能做吗？

A：可以优先选择灵敏度高的下游方法。客户反馈：淋巴细胞浓度虽不理想，RT-qPCR扩增曲线正常；约10万细胞样本电泳条带偏弱，qPCR Ct值可用。RNA浓度低于50ng/μL时260/230比值参考意义有限，以下游Ct值为准。

Q：珍稀细胞样本量少，怎么提取RNA？

A：可选择RNAflash™ DCA 1-step RT qPCR（SYBR Green）kit（500-103）、RNAflash™ DCA 2-step RT qPCR（probe）kit（500-106），1次实验测完Ct值，最少支持10个细胞。

技术支持

如有产品使用、样本适用性或数据问题，欢迎联系信天翁生物技术团队获取支持。

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品牌：GOONIE｜核酸提取与PCR试剂　｜　出品：信天翁生物科技（广州）有限公司