鸡脱碘酶（DID）ELISA检测试剂盒

鸡脱碘酶（DID）ELISA检测试剂盒

仅供科研使用，不可用于临床诊断

基础信息
- 中文名称：鸡脱碘酶（DID）ELISA检测试剂盒
- 英文名称：Chicken Deiodinase (DID) ELISA Kit
- 检测方法：双抗体夹心法 ELISA
- 规格：48T、96T
- 种属：鸡
- 样本类型：血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清及其他禽类生物体液
- 总实验时长：1.5‑3 h
- 保存条件：试剂盒2‑8℃避光保存，严禁冻存；有效期 6 个月

检测原理
酶标板预先包被鸡 DID 捕获抗体；加入标准品 / 待测样本，样本中 DID 与固相抗体结合；再加入 HRP 标记检测抗体，形成「固相抗体‑DID 抗原‑HRP 标记抗体」夹心免疫复合物；洗板去除未结合物质；加入 TMB 显色液，HRP 催化底物显蓝色；硫酸终止液终止反应变为黄色；OD450 吸光度与样本 DID 浓度正相关；四参数拟合标准曲线，计算样本 DID 浓度。

试剂盒组分
30倍浓缩洗涤液              终止液
酶标试剂                         标准品
酶标包被板                       标准品稀释液
样品稀释液         说明书
显色剂A液        封板膜
显色剂B液        密封袋

样本处理要点
1. 血清：全血室温静置 15‑20 min 凝固，2000‑3000 g 离心 20 min，取上清；有沉淀需再次离心。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸钠抗凝，避免肝素抗凝；离心取上清。
3. 组织匀浆：预冷 PBS 匀浆，12000 g 离心 10‑15 min，取上清检测；样本若不能立即检测分装‑20℃冻存，避免反复冻融。
4. 浑浊样本必须离心去除沉淀，否则会升高背景 OD 值。

简要操作流程
1. 试剂盒室温平衡 20‑30 min；浓缩洗涤液用纯水稀释为 1× 工作液。
2. 设置空白孔、标准品孔、待测样本孔，加入标准品 / 样本，封板，37℃孵育 60 min。
3. 弃液洗板 5 次，拍干。
4. 加入 HRP 酶标抗体工作液，封板，37℃孵育 60 min。
5. 弃液洗板 5 次，拍干。
6. 加入显色 A、B 液，37℃避光显色 10‑15 min。
7. 加入终止液，酶标仪读取OD450nm。
8. 四参数 Logistic 拟合标准曲线，计算样本 DID 浓度。

注意事项
1. 所有试剂仅限科研检测，不得用于动物临床诊断。
2. 终止液为稀硫酸，避免接触皮肤。
3. TMB 显色液避光保存，变色失效禁止使用。
4. 样本避免反复冻融；冻融≥3 次会造成 DID 蛋白降解，结果偏低。
5. 不同批次试剂盒组分不可以互换混用。