鸡Bcl-2相关X蛋白（BAX）ELISA检测试剂盒

鸡Bcl-2相关X蛋白（BAX）ELISA检测试剂盒

英文名称：Chicken Bcl‑2 associated X protein（BAX）ELISA Kit
用途：检测鸡血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液等生物样本中 BAX 蛋白含量；仅科研使用，不可用于临床诊断。

技术参数
- 检测方法：双抗体夹心法
- 规格：48T、96T
- 检测波长：酶标仪 450nm
- 样本上样体积：标准品 / 样本每孔100 μL
- 灵敏度：≤0.1 ng/mL，可识别天然及重组鸡 BAX；与 Bcl‑2 家族其他同源蛋白无显著交叉反应
- 精密度：板内 CV＜10%，板间 CV＜15%；样本加标回收率 85‑115%
- 总实验时长：约 90‑120 min

检测原理
微孔板预先包被鸡 BAX 特异性捕获抗体；加入标准品 / 待测样本，样本中 BAX 与固相捕获抗体结合；洗板去除未结合组分，加入 HRP 标记的 BAX 检测抗体，形成固相抗体‑BAX 抗原‑HRP 标记抗体夹心免疫复合物；再次洗板，加入 TMB 显色底物，HRP 催化底物生成蓝色产物；加硫酸终止液转为黄色；450nm 读取 OD 值，OD 大小与 BAX 蛋白浓度正相关，通过四参数标准曲线计算样本 BAX 浓度。

试剂盒组分
30倍浓缩洗涤液              终止液
酶标试剂                         标准品
酶标包被板                       标准品稀释液
样品稀释液         说明书
显色剂A液        封板膜
显色剂B液        密封袋
储存：2‑8℃避光保存，有效期 6 个月；禁止冷冻

适用样本类型
鸡血清、血浆（EDTA / 肝素抗凝）、组织匀浆、细胞裂解液、组织上清液等生物体液。

简要操作流程
1. 试剂回温至室温，浓缩洗涤液用纯水稀释为 1× 工作液；
2. 设置标准品孔、样本孔、空白孔，每孔加入 100 μL 标准品 / 待测样本，封板膜封闭，37℃孵育 60 min；
3. 弃液洗板 5 次，拍干；加入 HRP 标记抗体 100 μL，37℃孵育 30 min；
4. 弃液洗板 5 次，拍干；加入底物 A、B 各 50 μL，避光 37℃显色 10‑15 min；
5. 每孔加入终止液 50 μL 终止反应，5 min 内酶标仪 450 nm 读数；
6. 标准曲线拟合，计算样本 BAX 浓度，稀释样本需乘稀释倍数校正结果。

注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。