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- 北京
- 2026年08月14日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 英文名：
Stbl2 Competent Cell
- 保质期：
保存在-80℃，1年。
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- 保存条件：
保存在-80℃，1年。
- 规格：
10*100ul
基因型：
F-mcrAΔ(mcrBC-hsdRMS-mrr)recA1endA1longyrA96 thi supE44 relA1λ-Δ(lac-proAB)
操作方法：
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5min，加入目的质粒或连接产物，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃水浴锅中热激90s，立即插入冰中静置2-3min；
3. 添加900μL LB液体培养基，37℃摇床220rpm培养60min；
4. 离心（质粒转化无需离心，吸取100μL菌液涂布即可），倒掉上清，余下菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。
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文献和实验The Inoue Method for Preparation and Transformation of Competent E. coli: "Ultra Competent" Cells Joseph Sambrook Peter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne
一、材料与试剂 1. SOBor2xYT2. MES3. 足够80个管子的TFB（50 mL）/400转化DMSO4. 5 M NaCl 二、仪器 1. 离心机 三、步骤 1. 室温下在5 ml SOB或2×YT中接种菌并且培养过夜。2. 加过夜培养的菌到500 ml 的SOB或2×YT，其装在4L瓶中以最大限度的透气。加入36 ml 5 M 的NaCl，在30℃下培养。3. 大约3 h，OD600达到0.5。4. 离心细胞。取沉淀，吸取
野生型 E.coli 并不容易转化，这是由于细菌产生一种酶能迅速降解进入的外源 DNA 。经过多年的努力，科学家们发现了一种方法可以增加细胞吸收外源 DNA 的效率。那就是用化学方法处理细胞，使其改变膜对 DNA 的通透性。这种细胞就称为感受态细胞，即细胞处于能摄入核酸分子时的生理状态。这种方法已经成为基因工程的常规技术，它对于我们利用体外 DNA 重组技术来了解真核和原核生物的基因功能特别重要。细菌的转化有两种类型：一种是自然转化（ natural transformation
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
