- ￥2800
- 普诺赛
- CP-R108Y
- 武汉
- 2026年08月14日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
武汉益普生物科技有限公司
- 英文名：
Rat Brain Microvascular Endothelial Cells (Primary cell immortalization)
- 规格：
T25
产品信息
| 产品名称 | 大鼠脑微血管内皮细胞（原代永生化） |
| 英文名称 | Rat Brain Microvascular Endothelial Cells (Primary cell immortalization) |
| 组织来源 | 大脑皮质组织 |
| 默认种属 | SD大鼠，其他咨询 |
| 产品规格 | 5×10^5Cells/T25 / 5×10^5Cells/Vial |
| 细胞简介 | 大鼠脑微血管内皮细胞（原代永生化）是原代大鼠脑微血管内皮细胞经慢病毒转染的方式携带SV40T基因，经抗生素和传代筛选获得。大鼠脑微血管内皮细胞分离自大脑皮质组织；脑微血管内皮细胞是血脑屏障的主要组成成分，它是组成脑微血管腔面单层扁平上皮样细胞，能够限制可溶性物质和细胞等从血液进入大脑，大脑微血管内皮细胞与外周内皮细胞相比具有一些相同特性。它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用，在脑血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。与外周内皮细胞相同，大脑微血管内皮细胞表面表达细胞粘附分子，调控白细胞进入大脑。由于微血管内皮细胞的器官特异性，内皮细胞通常取源于疾病研究的相关组织。其主要特征如下：①脑微血管内皮细胞存在许多细胞间紧密连接，产生很高的跨内皮阻抗，延迟细胞旁的通量；②脑微血管内皮细胞缺乏内皮细胞的窗孔结构，其液相物质胞饮水平较低；③脑微血管内皮细胞具有不对称定位酶和载体介导转运系统，从而产生“两极分化”的表现型。 |
| 方法简介 | 普诺赛实验室分离的大鼠脑微血管内皮细胞（原代永生化）是原代大鼠脑微血管内皮细胞经慢病毒转染的方式携带SV40T基因，经抗生素和传代筛选获得，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。 |
| 质量检测 | 普诺赛实验室分离的大鼠脑微血管内皮细胞（原代永生化）经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 |
培养信息
| 自备试剂： |
|
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| 包被条件： | PLL（0.1 mg/mL）或明胶（0.1%） | ||||||||||
| 培养基： | 大鼠脑微血管内皮细胞（原代永生化）完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等) (CM-R108Y) | ||||||||||
| 冻存条件 | 冻存液：通用血清型程序冻存液[PB180436] 温度：液氮 |
||||||||||
| 携带基因： | SV40T,Puro | ||||||||||
| 换液频率： | 每2-3天换液一次 | ||||||||||
| 生长特性： | 贴壁 | ||||||||||
| 细胞形态： | 内皮细胞样 | ||||||||||
| 传代比例： | 第一次1:2，之后1:2-1:6 | ||||||||||
| 传代特性： | 可传10代 | ||||||||||
| 消化液： | 0.25%胰蛋白酶 | ||||||||||
| 说明 | 大鼠脑微血管内皮细胞（原代永生化）体外培养周期有限；建议使用普诺赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。 | ||||||||||
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文献和实验的[5]，但细胞得率均较低，而近些年来国外大多数方法采用以大脑皮质为材料、酶消化及梯度离心分离脑微血管段并进行原代培养[6~9,11,12]。由于原代培养中无法避免地混杂成纤维细胞、周细胞、平滑肌细胞、星型胶质细胞等其他细胞的生长，而且工作量大、过程繁琐且费用高[1]，进行较纯的大鼠脑微血管内皮细胞原代培养一直是国内外的一个难点。 本人参照文献[6]、[7]、[8]的方法，成功地摸索出大鼠脑微血管内皮细胞分离和原代培养的方法，并获得纯度较高的脑微血管内皮细胞。 1.材料与方法 1.1 实验动物 每次
小鼠脑微血管内皮细胞分离培养试剂盒专为提取原代小鼠脑微血管内皮细胞开发
分离培养试剂盒为例 白光图 免疫荧光鉴定 小鼠脑微血管周细胞（α-SMA） 大鼠主动脉内皮细胞（CD31） 小鼠肝实质细胞（CK-18） 使用普诺赛®原代细胞提取试剂盒获取的细胞具有高纯度、高活率以及典型的形态学特征，细胞状态稳定，贴壁生长良好，适用于各类后续实验操作，具备良好的实验重复性与一致性
抗人CD105单克隆抗体（NeoMarkers），兔抗人CD34、CD31多克隆抗体（Antibody Diagnostica Inc），兔抗人vW因子多克隆抗体（华美公司），抗兔及抗鼠ABC试剂盒、DAB显色试剂盒为华美公司产品，其他试剂均为国产分析纯以上级别。 3、方法: 植块法原代细胞培养： 细胞培养瓶的处理：选用50ml玻璃培养瓶，高压蒸汽灭菌，瓶底铺自制鼠尾胶（制作方法参见2），移入80℃烤箱烤干，临用前用消毒D-Hanks平衡盐缓冲液冲洗3次
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