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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 供应商:
北京诺博莱德科技有限公司
DM15000-II DNA Marker(500-15000bp)
目录号:41028A/41028B
规格:500μL(100T)/5×500μL(500T)
保存:4℃或常温可放置一年;长期保存请置于-20℃恒温环境,避免反复冻融。
产品简介:
DM15000-II DNA Marker由500bp,1000bp,2500bp,5000bp,7500bp,10000bp,15000bp七条DNA条带混合组成。条带相对位置及浓度见产品图。本产品为即用型产品,已含有1×loading buffer,直接取5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。
产品组成:
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产品名称 |
目录号 |
规格 |
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DM15000-II DNA Marker |
41028A |
500μL(100T) |
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DM15000-II DNA Marker |
41028B |
5×500μL(500T) |
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使用手册 |
41028sc |
1份 |
使用方法(仅供参考):
取5ul本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm加样孔宽度加1ul,如果加样孔较宽,可适当增加上样量)进行电泳.
注意事项:
“拖带现象”是琼脂糖凝胶中加入大分子染料(如GelRed)电泳时的一个常见现象,经常表现为小分子量条带相对较亮,大分子量条带相对较暗,整体条带下坠,条带间粘连等。我们的实验工作揭示造成此现象的本质原因是凝胶中的染料相对不足。
与EB等小分子量水溶性染料不同,GelRed在水中的溶解度极低,市售推荐的染料使用浓度跟EB的推荐使用浓度相差较大。当含GelRed的凝胶第一次被使用时,一般还是可以获得比较好的电泳效果,一旦凝胶被重复使用或浸泡在电泳液中时间过久,凝胶中的染料被释放至电泳液中,导致胶中染料浓度进一步降低,小分子DNA条带先进入凝胶结合染料后,后面大分子DNA再进入凝胶中时,供结合的染料相对不足,造成“拖带现象”。
改善琼脂糖凝胶(含大分子核酸染料)电泳时“拖带现象”的两个方向:
A.增加染料相对浓度
1.提前在Marker中加入核酸染料(如本产品中的增强剂)。
2.凝胶中可增加染料浓度,如10000×染料按5000×使用。
3.减少DNAMarker的上样量。
B. 减少染料损失
1.凝胶不要重复使用多次(电泳时染料向上迁移出凝胶)。
2.凝胶不要长时间浸泡在电泳液中,导致染料析出。
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息和纸板说明书为准。(版本V1.0)
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文献和实验,但若明确其中主要试剂的作用,所提取的质粒DNA 的纯度及质量会更高。笔者通过不同的试剂进行摸索,现将结果报告如下。1 材料和方法1. 1 材料1. 1. 1 实验菌株 使用菌株为大肠杆菌DH5α,菌株内含质粒pB I121,该质粒上克隆一h IL212基因。1. 1. 2 主要试剂 氨苄青霉素、RNaseA购自华美生物工程公司; DL15000、DL2000核酸分子量标记购自TAKARA公司;其它各种常规化学试剂均为分析纯。1. 2 方法1. 2. 1 质粒DNA的提取[ 1 ] 采用4种不同
1. Migration of marker dyes in native polyacrylamide non-denaturing gels Gel % Bromophenol blue (BP) Xylene cyanole (XC) 3.5 100 460 5.0 65 260 8.0 45 160 12.0 20 70 20.0
,共价闭合环状质粒DNA复性快,而线性的染色体DNA复性缓慢,经过离心与蛋白质和大分子RNA一起沉淀下去。 3.器材 超净工作台,接种环,酒精灯,台式离心机,旋涡混合器,微量移液取样器,1.5ml微量离心管,恒温摇床,摇菌试管,双面微量离心管架,试管架,标签纸,磁力搅拌器等。 4.试剂 Pinpoint™xa-3质粒载体菌,pBS-CHI载体菌,LB培养基1000ml(含100µg/ml氨苄青霉素),葡萄糖/Tris/EDTA(GTE)溶液(溶液 I),NaOH/SDS溶液(溶液 II
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