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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
一年
- 供应商:
北生京泽(启东)生物科技有限公司
- 保存条件:
室温运输与储存
- 规格:
250mL
是一种用于在碱性条件下进行琼脂糖凝胶电泳的浓缩缓冲液。它的核心作用是在电泳过程中提供一个稳定的高pH环境,常用于分析DNA单链断裂、DNA复制中间体等特殊核酸样本
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文献和实验(pH6.8) 1.5 mol/L Tris•HCl(pH8.8) 10% SDS 10% 过硫酸胺(APS) 还原型 5XSDS 上样缓冲液 10X 电泳液缓冲液 10X 转膜缓冲液 1X 转膜缓冲液 10XTBS 缓冲液 1XTBST 缓冲液 封闭缓冲液: 1X TBST含5% w/v 脱脂牛奶或者 1X TBST 含 2%-5% 的牛血清白蛋白(BSA)。 操作步骤 根据待测蛋白分子量大小确定凝胶(分离胶)浓度制胶 上样使用适当的裂解液以及裂解方法裂解贴壁细胞、悬浮细胞或者组织
,最长使用时间一般不宜超过3天。标记好的探针可以保存在 -20℃。3. EMSA 胶的配制:(1) 准备好倒胶的模具。可以使用常规的灌制蛋白电泳胶的模具,或其它适当的模具。最好选择可以灌制较薄胶的模具,以便于干胶等后续操作。为得到更好的结果,可以选择可灌制较大 EMSA 胶的模具。(2) 按照如下配方配制20毫升4%的聚丙烯酰胺凝胶(注意:使用29:1等不同比例的Acr/Bis对结果影响不大)。TBE buffer (10X) 1毫升重蒸水 16.2毫升39:1 acrylamide
操作篇:western blot 之 SDS-PAGE 电泳
电泳篇开始 一、清洗玻璃板 一只手扣紧玻璃板,另一只手蘸点洗衣粉轻轻擦洗。两面都擦洗过后用自来水冲,再用蒸馏水冲洗干净后立在筐里晾干。 二、灌胶与上样 1. 玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶。 注意:可以用 1% 琼脂糖在垂直电泳槽的左. 右和下部封边,五分钟后重复一次,这样可以保证基本不漏胶。 2. 按前面方法配 10% 分离胶,加入 TEMED 后立即摇匀即可灌胶。灌胶时,可用 10 ml 枪吸取 5 ml 胶沿玻璃
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