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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Diagnostic Kit for EAEC DNA(Real-Time PCR Method)
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50T/盒
肠集聚性大肠杆菌(EAEC)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
基本信息
产品名称:肠集聚性大肠杆菌(EAEC)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
英文名称:Diagnostic Kit for EAEC DNA(Real-Time PCR Method)
规格:50T / 盒
用途:本试剂盒适用于检测水样粪便,疑似污染的水、食物等样本中的肠集聚性大肠杆菌,用于肠集聚性大肠 杆菌感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
检测原理:本试剂盒采用 TaqMan 探针法实时荧光 PCR 技术,设计一对肠集聚性大肠杆菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光 PCR 技术对肠集聚性大肠杆菌的 DNA 进行体外扩增检测,用于科研实验中对可疑感染病料的病原学检测。
适用仪器:ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
试剂盒组分
包装规格 50T/盒
EAEC 反应液 500μL×2 管
酶液 50μL×1 管
EAEC 阳性质控品 50μL ×1 管
阴性质控品 250μL ×1 管
储存与有效期
-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次,有效期 12 个月。
样本要求与处理
1. 样本类型与采集
水样便取 0.5~1mL;疑似污染的食物取 1g。
2. 核酸提取(自备或配套提取试剂盒)
推荐采用上海烜雅生物科技有限公司生产的核酸提取或纯化试剂(磁珠法或离心柱法)进行核酸提取,请按照试剂说明书进行操作。
结果判读
阳性:检测通道 Ct 值≤40,且曲线有明显的指数增长曲线;
阴性:样本检测结果 Ct 值>40 或无 Ct 值。
优势与注意事项
优势
快速:全程2–3 h,远快于培养法(24–48 h)
灵敏特异:直接检测毒力基因,低载量可检出
防污染:闭管检测,内参质控,降低假阴 / 阳性
注意事项
仅用于科研检测,结果需结合临床综合判断
严格分区(样本处理 / 扩增),防交叉污染
不同批次试剂不可混用;Taq 酶冰上操作
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文献和实验肠集聚性大肠杆菌(EAEC)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
基因芯片技术具有快速多样、微型化和自动化等特点在生物医学领域广泛的应用。但由于其基本原理是基于核酸杂交技术,有着内在的缺陷,实验的敏感性和重复性都存在一定问题。核酸杂交较适合于检测基因的表达,不易检测基因组DNA的基因的重排,突变和缺失。而大多数肿瘤性疾病和一些遗传变异和表型的改变与后者有关。为了解决上述问题,我们将芯片技术与荧光PCR技术相结合,设立设计一种含有大量微反应池的PCR基因芯片,以期能快速、准确的对基因的重排,突变和缺失等基因变异进行检测。常规PCR反应产物的检测是电泳后观察获得
收到的能量较少。这样可以减少紫外线对核酸的损害,但也会降低凝胶条带的信号。另一方面,透射仪器可为条带提供更高的信号,但由于辐射接近凝胶,会增加紫外线造成的伤害。 图 5. 反射照明器和透射仪 b. 放射自显影法 在放射性核酸的电泳过程中,凝胶电泳后会暴露在 x 射线胶片上,这一过程即称为放射自显影法。条带辐射的强度可用光密度测定来定量。 参考文献 1.Stellwagen NC (1998) DNA Gel Electrophoresis. In: Tietz D (editor
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