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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Diagnostic Kit for Vibrio- cholerae O1 DNA(Real-Time PCR Method)
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50T/盒
霍乱-弧菌O1(VC O1)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
基本信息
通用名称:霍乱-弧菌 O1(VC O1)核酸检测试剂盒(荧光 PCR 法)
包装规格:50T / 盒
储存条件:-20℃±5℃避光,避免反复冻融(≤5 次)
有效期:12 个月
检测原理
本试剂盒用一对霍乱-弧菌 O1 特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光 PCR 技术对霍乱-弧菌 O1 的 DNA 进行体外扩增检测,用于科研实验中对可疑感染者的病原学检测。
试剂盒组成
包装规格 50T/盒
VC O1 反应液 500μL×2 管
酶液 50μL×1 管
VC O1 阳性质控品 50μL ×1 管
阴性质控品 250μL ×1 管
样本要求
类型:粪便(水样便 0.5–1 mL)、食品(1 g 匀浆)、水样(100 μL)、培养物
保存:短期 - 20℃;长期 - 70℃(≤6 个月);运输 2–8℃冰袋
前处理:
粪便:13,000 rpm 离心 2 min,取沉淀提取 DNA
食品:研磨后离心取上清
水样:直接离心浓缩
操作流程
核酸提取:磁珠法 / 柱式法提取样本 DNA
体系配制(20 μL):PCR 反应液 15 μL + 模板 DNA 5 μL
扩增程序:
预变性:95℃ 3 min
40 循环:95℃ 5 sec → 55℃ 40 sec(FAM 通道采集荧光)
结果判读:
阳性:检测通道 Ct 值≤35,且曲线有明显的指数增长曲线;
可疑:检测通道 35
阴性:样本检测结果 Ct 值>38 或无 Ct 值。
适用仪器
ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、MJ Opticon2、LightCycler480、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR
检测仪。
注意事项
严格分区:样本处理、试剂配制、扩增区物理隔离
试剂融化后混匀、短暂离心;不同批号组分不可混用
操作全程无菌,避免核酸污染
本产品仅供科研
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文献和实验霍乱-弧菌O1(VC O1)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
1.分类 (1)血清分型 霍乱弧菌(V.cholerae)有不耐热的H抗原和耐热的O抗原。前者为共同抗原,特异性低,后者具有群特异性和型特异性,是霍乱弧菌分群和分型的基础。根据O抗原的不同,霍乱弧菌现有155个血清群,其中仅O1群和O139群引起霍乱。O139血清群是新出现的型别,与O1群抗血清无交叉反应,但可与O22和O155血清群产生交叉反应,遗传学特征和毒力基因与O1群相似。O2血清群~O138血清群可引起人类的胃肠炎,无明显的季节分布,不引起霍乱
有数量较多的弧菌才检出。 (四)免疫荧光试验 除一般免疫荧光法外,还可用荧光菌球法检查。 四、防治原则 必须贯彻预防为主的方针,作好对外交往及入口的检疫工作,严防本菌传入,此外应加强水、粪管理,注意饮食卫生。对病人要严格隔离,必要时实行疫区封锁,以免疾病扩散蔓延。 人群的菌苗预防接种,可获良好效果,现用加热或化学药品杀死的古典型霍乱菌苗皮下接种,能降低发病率。这种苗菌对EL-Tor 型霍乱弧菌感染也有保护作用,但持续时间短,仅3-6个月。近年来,有使用口服
除一般免疫荧光法外,还可用荧光菌球法检查。 四、防治原则 必须贯彻预防为主的方针,作好对外交往及入口的检疫工作,严防本菌传入,此外应加强水、粪管理,注意饮食卫生。对病人要严格隔离,必要时实行疫区封锁,以免疾病扩散蔓延。 人群的菌苗预防接种,可获良好效果,现用加热或化学药品杀死的古典型霍乱菌苗皮下接种,能降低发病率。这种苗菌对EL-Tor 型霍乱弧菌感染也有保护作用,但持续时间短,仅3-6个月。近年来,有使用口服菌苗(大剂量、反复服用),类毒素及类毒素与死菌的混合
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