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        霍乱弧菌及其检验

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        1.分类

        (1)血清分型 霍乱弧菌(V.cholerae)有不耐热的H抗原和耐热的O抗原。前者为共同抗原,特异性低,后者具有群特异性和型特异性,是霍乱弧菌分群和分型的基础。根据O抗原的不同,霍乱弧菌现有155个血清群,其中仅O1群和O139群引起霍乱。O139血清群是新出现的型别,与O1群抗血清无交叉反应,但可与O22和O155血清群产生交叉反应,遗传学特征和毒力基因与O1群相似。O2血清群~O138血清群可引起人类的胃肠炎,无明显的季节分布,不引起霍乱流行,不被O1群霍乱弧菌多价血清所凝集,称之为非O1群霍乱弧菌,以往也称不凝集弧菌或非霍乱弧菌。

         

         

        O1群霍乱弧菌的O抗原由A、B、C三种抗原成分组成,A是O1群的群特异性抗原,通过三种抗原成分的不同组合可分成三个型别:AB构成小川型、AC构成稻叶型、ABC构成彦岛型。彦岛型的抗原性不稳定,各型之间可以相互转换,以小川型和稻叶型为常见流行型别。

         

         

        (2)生物型 根据生物学特性,O1群霍乱弧菌可分为古典生物型和El-Tor生物型,两个生物型具有相同的血清型。El-Tor生物型是具有溶血性的生物型,现发现El-Tor生物型细菌在环境中的抵抗力、存活力更强,在我国流行的以El-Tor小川型为主。

         

         

        (3)噬菌体分型 根据霍乱弧菌对噬菌体的裂解模式不同进行分型,得到32个型,其中第Ⅳ组和第Ⅴ组噬菌体较为实用,前者以裂解古典生物型为主,后者仅对El-Tor生物型有高度特异性。

         

         

        2.细菌特性

        (1)形态染色 革兰染色阴性,呈弧形或逗点状,菌体尾端有一鞭毛,运动活泼,悬滴镜检可见穿梭状运动,患者粪便直接涂片可见弧菌纵列呈“鱼群”样,O139群弧菌亦为单端单鞭毛,有荚膜。

        (2)培养特性 需氧或兼性厌氧菌,在16~44℃均可生长,最适生长温度37℃;营养要求不高,在普通培养基上生长良好,耐碱,在pH6.8~10.2范围均可生长,一般增菌培养常用pH8.4~8.6的1%碱性蛋白胨水进行选择性增菌。常用的选择性培养基有硫代硫酸钠-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板(TCBS平板),霍乱弧菌发酵蔗糖产酸,菌落呈黄色;4号琼脂和庆大霉素琼脂平板,因含亚碲酸钾,霍乱弧菌在其上生长将培养基中的碲离子还原成元素碲,形成灰褐色菌落。血平板上菌落较大,El-Tor生物型可形成β溶血环。可在无盐培养基上生长,但在含有高于60g/L氯化钠的培养基上不能生长;O139群霍乱弧菌能在无盐及30g/L氯化钠蛋白胨水中生长,不能在80g/L浓度下生长。

        (3)生化反应 氧化酶、明胶液化和吲哚试验阳性,发酵蔗糖和甘露醇,赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶阳性,精氨酸双水解酶阴性。霍乱弧菌古典生物型和El-Tor生物型的区别见表12-1。

         

         

        (4)抵抗力 霍乱弧菌对干燥、热、酸和消毒剂均敏感,但在自然环境中存活时间较长, O139群霍乱弧菌在水中存活时间较O1群霍乱弧菌长。

                           表12-1 霍乱弧菌古典生物型和El-Tor生物型的区别

         

         

         

         

         

        特征

         

         

        古典生物型

        El-Tor生物型

        羊红细胞溶血

        -

         

         

        D

        鸡红细胞凝集

         

         

        -

         

         

        +

         

         

        VP试验

         

         

        -

         

         

        +

        CAMP试验

        -

        +

         

         

        多粘菌素B敏感试验

         

         

        +

        -

        Ⅳ组噬菌体裂解

         

         

        +

        -

         

         

        Ⅴ组噬菌体裂解

        -

         

         

        +

         

         

        注:+,≥90%阳性;-,≥90%阴性;D,10%89%阳性。

         

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