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植物 FISH 双标三色共聚焦多视野拍照实验服务

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  • 植物 FISH 双标三色共聚焦多视野拍照实验服务
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  • 2026年07月06日
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      上海经科化学科技有限公司

    • 服务名称

      植物荧光原位杂交FISH激光共聚焦拍照全套(双标三色)

    • 规格

    一、服务简介

    本服务为植物组织双标三色荧光原位杂交搭配激光共聚焦定点拍照一体化科研服务,仅可用于科研用途,不可用于临床诊断。可同步选择单标双色、三标四色共聚焦拍照全套服务。

    技术原理

    荧光原位杂交(FISH)利用荧光标记的已知核酸探针,与细胞、组织切片内核酸杂交,依托组织原位结构完成靶标核酸精确定量与定位;多种荧光素标记探针可同步检测多个基因在组织内的空间位置、分布与共定位关系。
     
    植物组织含有叶绿素、叶黄素、木质素、阿魏酸、角质素、木栓质、孢粉质等物质,会产生强烈自发荧光,常规化学手段难以去除,严重干扰植物 FISH 信号判读。
     
    样本完成杂交标记后采用超高分辨率白激光共聚焦显微镜成像,搭载荧光寿命 TauSenes 成像技术,依靠组织自发荧光与靶标标记荧光素光寿命差异完成光谱拆分,自动识别并清除各类植物组织自发荧光,消除背景干扰。

    成像交付规范

    本服务统一拍摄 2 个倍数、3 个视野,交付 6 张各荧光通道独立图片及通道融合合成图,同时提供 LIF 原始成像文件、TIF 格式导出图片。因单次拍照视野存在局限,送样前需完整填写共聚焦成像送样单,注明所需拍摄倍数、目标观测视野。
     
    若样本自带特异性荧光需要同步采集成像,需提前提供该荧光染料对应的激发波长、发射波长参数;未提供对应参数时,成像系统会自动剔除除原位杂交标记荧光以外的全部荧光信号。

    SweAMI 原位信号放大技术优势

    整套原位杂交实验采用 SweAMI 原位信号放大技术,依托 DNA 重复序列与 DNA 分支结构,使靶标位点结合大量信号探针,相比传统直标探针原位杂交具备多项优势:
    1. 理论可实现约 4000 倍信号放大,增强荧光信号、提升信噪比,特异性识别靶核酸,背景低、实验结果稳定可靠;
    2. 采用多序列混合探针体系,进一步提升探针杂交结合效率;
    3. 兼容 DAB、NBT、AEC 明场显色,同时支持荧光单标、双标、三标、四标多重检测;
    4. 探针合成周期短,最短 2 天即可完成合成,通过流程优化能够缩短整体实验周期。

    二、完整实验流程

    1. 样本固定:使用植物专用原位杂交固定液处理样本,4℃低温保存运输;
    2. 样本制片:制备石蜡包埋切片或冰冻切片;
    3. 探针定制:确认植物种属与目标基因名称,开展探针设计与合成;
    4. 原位杂交标记:完成植物组织双标三色 FISH 杂交标记;
    5. 共聚焦定点拍照:超高分辨率白激光共聚焦显微镜定点采集成像。
       
      备注:本服务仅包含原位杂交标记、共聚焦成像两项内容。

    三、样本送样与运输规范

    1. 新鲜组织制备冰冻切片:新鲜组织液氮速冻 15s 后转入 - 80℃保存,干冰全程运输,全程禁止冻融;
    2. 固定完整组织:切取厚度约 2mm 新鲜组织,5min 内投入植物原位杂交固定液固定,4℃低温保存运输,严禁冷冻结冰;需尽快包埋切片,固定时间过长会降低核酸检出效率;
    3. 预制冰冻切片:-20℃条件保存、运输;
    4. 预制石蜡切片:常温条件保存、运输。

    四、交付成果

    2 个倍数 3 个视野的各荧光通道原图、多通道融合合成图,配套 LIF 原始成像文件、TIF 导出图片;图片已去除植物组织自发荧光干扰,直观呈现两组靶标三色荧光信号在植物组织内的分布、共定位情况。
     

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