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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称:
植物荧光原位杂交FISH 双标三色共聚焦全景扫描科研检测服务
- 规格:
张
一、服务简介
技术基础原理
配套 SweAMI 原位信号放大技术优势
- 理论可实现约 4000 倍信号放大,增强荧光信号、提升信噪比,特异性识别靶核酸,背景干扰低,实验结果稳定可靠;
- 采用多序列混合探针体系,进一步提升探针杂交结合效率;
- 兼容 DAB、NBT、AEC 明场显色,同时支持荧光单标、双标、三标、四标多重检测;
- 探针合成周期短,最短 2 天即可完成合成,通过流程优化可缩短整体实验周期。
二、完整实验流程
- 样本固定:采用植物专用原位杂交固定液处理样本,4℃低温保存运输;
- 样本制片:完成石蜡包埋切片或冰冻切片制备;
- 探针定制:确认植物种属与目标基因名称,开展探针设计与合成;
- 原位杂交标记:完成植物组织双标三色 FISH 杂交标记;
- 共聚焦全景成像:超高分辨率白激光共聚焦显微镜扫描成像。
备注:本服务仅包含原位杂交标记、共聚焦成像两项内容。
三、样本送样与运输规范
- 新鲜冰冻切片样本:新鲜组织液氮速冻 15s 后转入 - 80℃保存,干冰全程运输,全程禁止冻融,用于制备冰冻切片;
- 固定完整组织:切取厚度约 2mm 新鲜组织,5min 内投入植物原位杂交固定液固定,4℃低温保存运输,严禁冷冻结冰;需尽快包埋切片,固定时间过长会降低核酸检出效率;
- 预制冰冻切片:-20℃条件保存、运输;
- 预制石蜡切片:常温条件保存、运输。
四、交付成果
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文献和实验体异常的识别得益于二十世纪六十年代后发展起来的胰蛋白酶-姬姆萨染色和常规显带技术,使得常规筛查全基因组染色体异常和检测染色体核型改变成为可能。染色体显带是细胞遗传学分析技术中标准和常用的方法,但耗时且依赖于获得良好的分裂相,还难于分析复杂和隐匿的异常。 PCR或荧光原位杂交(FISH,fluorescent in situ hybridization)对染色体异常的检出依赖于引物或探针与模板的结合,因此较常规显带具有更高的特异性,是高通量检测染色体异常的敏感和特异的方法。
荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)
实验原理荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究待许多领域。FISH的基本原理是用已知的标记单链核酸为探针,按照碱基互补的原则,与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸
荧光原位杂交 (FISH) 许多疾病 相关基因的突变涉及染色体的畸变,如脆性X病、杜氏肌营养不良以及绝大多数的恶性肿瘤。这些畸变可以用细胞遗传学的方法检测出来。肿瘤细胞一般多有非随机的染色体片段丢失或扩增,而更多的疾病则只是发生一些细胞遗传学上不可见的变异,如点突变、微小插入或缺失等。在许多情况下,这种变异会导致病理性表型的出现。这种情况一般是染色体的畸变破坏了畸变染色体片段内或及其邻近基因的完整性,使得该基因不能正常转录得到完整的功能性mRNA,或是基因
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