马疱疹病毒1型（EHV-1）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

马疱疹病毒1型（EHV-1）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

基本信息
产品名称：马疱疹病毒 1 型（EHV-1）核酸检测试剂盒（荧光 PCR 法）
英文名称：Diagnostic Kit for Equine herpesvirus type 1 DNA(Real-Time PCR Method)
规格：50T（50 次反应）
货号：XY-PCR259Y（烜雅生物）
方法学：TaqMan 探针法实时荧光定量 PCR
检测靶标：EHV-1 糖蛋白 B（gB）基因保守区
适用样本：鼻拭子、全血、组织（肝、脾）、流产胎儿组织等
适用仪器：ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
储存 / 运输：-20℃避光保存，避免反复冻融；干冰运输；有效期 12 个月

试剂盒组成
包装规格    50T/盒
EHV-1 反应液    500μL×2 管
酶液    50μL×1 管
EHV-1 阳性质控品    50μL ×1 管
阴性质控品    250μL ×1 管

检测原理
针对 EHV-1 的 gB 基因保守区设计特异性引物和 TaqMan 荧光探针。PCR 扩增时，探针与模板结合，Taq 酶的 5'→3' 外切酶活性切割探针，释放荧光信号。FAM 通道实时监测荧光强度，实现病毒核酸的定性 / 定量检测。

性能指标
灵敏度：≤100 拷贝 / 反应；检测下限可达 2–4 拷贝 / 反应
特异性：与 EHV-4、EHV-3、EHV-8、EHV-9 及其他马源病原体无交叉反应
线性范围：2×10³～1×10⁸ copies/mL
精密度：批内 / 批间 CV≤3%

操作流程（25μL 体系）
样本处理：取鼻拭子 / 全血，提取病毒 DNA（磁珠法 / 离心柱法）。
反应液配制：2×qPCR 预混液 19μL + 引物探针混合液 1μL，分装 20μL / 管。
加样：取 5μL 模板 / 阳性对照 / 阴性对照，加入反应管，离心混匀。
PCR 扩增：
95℃ 2min（1 循环）
95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45 循环，60℃采集 FAM 荧光）
结果判读：
阳性：Ct≤35，S 型扩增曲线
可疑：35＜Ct＜40，建议复测
阴性：Ct≥40 或无扩增曲线
质控：阳性对照 Ct≤32；阴性对照无扩增，否则实验无效

注意事项
仅用于科研，不可用于人类诊断。
严格分区（样本处理、配液、扩增），防止交叉污染。
避免反复冻融试剂，影响酶活性。