马疱疹病毒4型（EHV-IV）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

马疱疹病毒4型（EHV-IV）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

基本信息
产品名称：马疱疹病毒 4 型（EHV-IV）核酸检测试剂盒（荧光 PCR 法）
英文名称：Equine Herpesvirus 4 (EHV-4) Real-Time PCR Kit
规格：50 次 / 盒（20μL 或 25μL 反应体系）
用途：体外定性 / 定量检测马鼻咽拭子、全血、组织等样本中 EHV-4 DNA；仅限科研检测，不用于人类临床诊断
储存与保质期：-20℃避光保存，12 个月；避免反复冻融

检测原理
采用TaqMan 探针法实时荧光定量 PCR：
针对 EHV-4 保守基因（如 gB 糖蛋白基因）设计特异性引物与 FAM 标记探针。
扩增时 Taq 酶 5'→3' 外切酶活性切割探针，释放荧光信号，荧光强度与病毒核酸量成正比。
通过Ct 值定性判读，或标准曲线（10¹~10⁷拷贝 /μL）绝对定量。

试剂盒组成（50T）
名    称    规    格
酶液    50μL×1 管
EHV-IV 反应液    500μL×2 管
EHV-IV 阳性质控品    50μL ×1 管
阴性质控品    250μL ×1 管

性能指标
灵敏度：最低可检出10–100 拷贝 / 反应
特异性：与 EHV-1、EHV-2、EHV-3、EHV-5 等马疱疹病毒及其他马呼吸道病原无交叉反应
重复性：Ct 值变异系数（CV）≤2%
线性范围：10¹–10⁷拷贝 /μL，R²≥0.99

适用样本类型
鼻咽拭子、鼻腔冲洗液
EDTA 抗凝全血、血清
肺、肝、脾、流产胎儿组织
样本保存：4℃≤7 天，-20℃长期保存

操作流程（20μL 体系）
核酸提取：用 DNA 提取试剂盒纯化样本 DNA。
体系配制（冰上）：
2× 预混液：10μL
引物 - 探针混合液：1μL
模板（样本 / 对照）：5μL
无菌水：4μL
PCR 程序（实时荧光 PCR 仪）：
预变性：95℃，10min
40 循环：95℃ 15s → 60℃ 1min（FAM 通道采集荧光）
结果判读：
阳性：Ct≤35，扩增曲线呈指数增长
可疑：35＜Ct≤38，建议复检
阴性：Ct＞38 或无 Ct 值

质控标准
阳性对照：Ct≤30，典型扩增曲线
阴性对照：无 Ct 或 Ct＞38
内参（可选）：确保无抑制与提取有效

产品特点
高特异：型别特异性强，无交叉反应
高灵敏：早期检出，适合潜伏感染监测
快速：全程约 1.5 小时
便捷：即用型预混液，减少操作误差
适配广：ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪

注意事项
严格分区操作（试剂配制、样本处理、扩增），防污染
使用无酶耗材与滤芯枪头
试剂融化后充分混匀，避免反复冻融
结果仅用于科研 检测，不用于人类临床