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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
200
- 英文名:
Porcine Respiratory and Reproductive Syndrome Virus Mutant Type Detection Kit (Real-Time PCR Method)
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50T/盒
猪蓝耳病病毒变异株(PRRSV-M)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
基本信息
产品名称:猪蓝耳病病毒变异株(PRRSV-M)核酸检测试剂盒(荧光 PCR 法)
品牌:烜雅生物
货号:XY-PCR211Y
规格:50T / 盒
保存条件:-20℃避光,避免反复冻融
有效期:12 个月
检测方法:实时荧光 PCR(TaqMan 探针法)
检测时间:约 60 分钟
适用样本:血清、全血、肺 / 扁桃体 / 淋巴结组织、口腔拭子等
预期用途
定性/定量检测猪样本中的高致病性猪蓝耳病病毒(PRRSV-M)RNA,用于临床辅助诊断、猪场净化、引种检疫及流行病学监测。
检验原理
针对 PRRSV-M 基因组高度保守区(如 ORF5/NSP2 变异区)设计特异性引物与荧光探针(FAM 通道);经一步法 RT-PCR扩增,荧光信号随产物积累实时释放,仪器检测并分析 Ct 值,实现定性判定。
试剂盒组成(50T)
PRRSV-M RT-PCR 反应液:875 μL / 管(含缓冲液、dNTPs、引物探针)
PRRSV-M 混合酶液:125 μL / 管(含逆转录酶、Taq 酶、UNG 酶)
阳性对照(PRRSV-M 质粒):40 μL / 管
阴性对照(灭菌纯水):40 μL / 管
说明书:1 份
性能参数
最低检测限:≤10 拷贝 /μL
检测范围:2×10³~1×10⁸ copies/mL
特异性:不与经典型 PRRSV(PRRSV-C)、猪瘟(CSFV)、圆环病毒(PCV2)等交叉反应
符合率:与测序结果一致性>98%
荧光通道:FAM(PRRSV-M)
适用仪器
ABI 7500/QuantStudio 系列
Bio-Rad CFX 系列
Roche LightCycler 480
Agilent MX 系列
操作流程(25 μL 体系)
样本处理:组织研磨取上清;血液 / 拭子按常规提取 RNA。
试剂配制:冰上混合反应液 20 μL + 酶液 5 μL,分装至 PCR 管。
加样:各管加 5 μL RNA 模板 / 对照;阴性对照无扩增、阳性对照 Ct≤30 为有效。
扩增程序:
逆转录:50℃,10 分钟
预变性:95℃,2 分钟
循环(40 次):95℃ 15 秒 → 60℃ 1 分钟(采集 FAM 荧光)
结果判读:
阳性:Ct≤35,S 型扩增曲线
可疑:35<Ct≤38,建议复检 / 测序
阴性:无扩增曲线
核心优势
高灵敏特异:探针法特异性强,可检出低载量 / 早期感染样本。
防污染设计:含 dUTP/UNG 酶,降解残留扩增产物,降低假阳性。
快速高效:全程约 60 分钟,适配多种样本,适合批量筛查。
注意事项
严格分区(样本处理 / 试剂配制 / 扩增),避免交叉污染。
RNA 易降解,样本避免反复冻融,建议 - 80℃保存。
不同批号试剂不可混用;阳性对照严防泄漏。
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文献和实验猪蓝耳病病毒变异株(PRRSV-M)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
唾液或鼻咽拭子测试对于呼吸道疾病的病原体检测至关重要,未来将越来越多地用于Covid疫苗接种后的免疫检测。在这种情况下,鼻咽拭子或唾液样本的潜在高传染性通常会导致用户危险和相关的监管障碍。然而,对于唾液和鼻咽拭子检测如 SARS-CoV-2 抗原快速检测,安全设计如采用SafetyTector™ S 病毒灭活缓冲液则能很容易即可实现。 CoViD-19大流行突显了良好的诊断方法在控制公众传染病方面的重要性。除了使用核酸扩增检测 (NAT),如现在广为人知的聚合酶链式反应 (PCR)进行早期
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