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- 2026年08月20日
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- 文献和实验
- 技术资料
| 名称 | HBE135-E6E7 人支气管上皮细胞（STR鉴定） |
| 别名 | HBE 135-E6E7; HBE 135-E6/E7 |
| 种属 | 人 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样；卵圆形 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 培养条件 | HBE135-E6E7细胞专用培养基（含血清）。气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃。湿度：70%-80% |
| 推荐传代比例 | 1:2-1:3 |
| 换液频率 | 2-3次/周 |
| 冻存条件 | 冻存液：90% FBS+10% DMSO；温度：液氮 |
| 背景描述 | HBE135-E6E7 细胞系源自正常支气管上皮细胞，取自一名因鳞状细胞癌而接受肺叶切除术的男性。来自第一代外植体的细胞被含有人乳头瘤病毒 (HPV) E6E7 基因的重组逆转录病毒 LXSN16E6E7 感染。在存在 0.4 mg/mL G418 的情况下选择细胞。 |
| 组织来源 | 支气管 |
| 生物安全等级 | BSL-2 |
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识，因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……，这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁，要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
实验材料： 1. 手术切除的含支气管的正常肺组织 2. 胰蛋白酶/EDTA液：0.05%胰蛋白酶，0.5mmol/L EDTA 3. 6孔培养板：用多聚赖氨酸包被 4. 不含Ca2+ 和Mg2+的1×PBS（pH=7.2），添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素，pH7.4 5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪，眼科镊 6. 离心管（15ml、50ml） 实验方法： 1. 将分离的两片肺叶组织用含双抗的1×PBS
冲洗，以除去血液和粘液。 2. 将气管或支气管的一端结扎，另一端插套管并固定。用注射器经套管注入1%中性蛋白酶，至气管充盈为止。将气管浸泡于PBS中，在37℃条件下消化20min。 3. 用注射器抽取培养液，将注射器插入套管，反复冲洗，以分离气管上皮细胞。然后，将气管或支气管游离端的结扎线剪断，回收管腔内的细胞悬液。 4. 用200目不锈钢网筛过滤，将滤液离心（1000r/min，10min）。弃上清液后，再用培养液洗涤离心1次。 5. 用培养液悬浮沉淀细胞，调整细胞
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