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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
200
- 英文名:
Porcine Respiratory and Reproductive Syndrome Virus European type Detection Kit (Real-Time PCR Method)
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50T/盒
猪蓝耳病病毒欧洲株(PRRSV-E)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
预期用途
猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Respiratory and Reproductive Syndrome, PRRS),又称蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起猪的高度接触性传染病,我国列为二类传染病。该病的主要临床特征为:厌食,发热, 母猪流产、产死胎、产弱胎和木乃伊胎以及各种年龄猪呼吸困难。根据基因型和抗原性的差异,PRRSV 通常被分为欧洲型和美洲型,我国主要流行的是美洲型 PRRSV,但近几年我国多地区也相继分离到欧洲型 PRRSV。
本试剂盒适用于检测肺、扁桃体和口腔拭子、全血等标本中猪蓝耳病病毒欧洲株,适用于猪蓝耳病病毒欧洲株感染的辅助诊断。
检测原理
本试剂盒对猪蓝耳病病毒欧洲株设计特异性引物和探针,用一步法荧光 RT-PCR 技术对猪蓝耳病病毒经典型 RNA 进行体外扩增检测,用于科研实验中对可疑感染者的病原学检测。
主要组分(50T)
包装规格 50T/盒
PRRSV-E 反应液 500μL×2 管
酶液 50μL×1 管
PRRSV-E 阳性质控品 50μL ×1 管
阴性质控品 250μL ×1 管
技术参数
检测方法:实时荧光 RT-PCR(RNA 病毒)
靶标基因:PRRSV-EU ORF5
荧光通道:FAM(EU);内参:HEX/VIC
最低检测限:≤10 拷贝 /μL(高敏)
特异性:100%(不与 PRRSV-NA、HP、PCV2、TGEV 等交叉)
符合率:与 NGS 测序一致性>99%
线性范围:10¹–10⁷拷贝 /μL
反应体系:20μL(19μL 反应液 + 1μL 模板)
适用样本与保存
样本类型:血清 / 血浆、肺 / 扁桃体组织、口腔拭子、全血、精液
保存:4℃≤24h;-20℃≤3 个月;-70℃长期;避免溶血 / 反复冻融
扩增程序(标准)
反转录:50℃ 15min
预变性:95℃ 3min
循环(40 次):95℃ 5s → 55℃ 40s(FAM 采集荧光)
结果判定
阳性:Ct≤35,典型 S 型扩增曲线
可疑:35<Ct≤38,重复仍阳性则判阳
阴性:Ct>38 或无扩增曲线
质控:阳性对照 Ct≤32;阴性对照无扩增;内参正常
存储与有效期
存储:-20℃避光;避免反复冻融
有效期:12 个月(未开封)
仪器适配
ABI 7500/7300、Bio-Rad CFX96、罗氏 LightCycler 480等主流实时荧光 PCR 仪。
产品优势
高敏特异:单拷贝级检测,专属欧洲株分型
快速高效:1.5–2 小时出结果,一步法操作
内参质控:防假阴性,监控样本质量
合规可靠:符合 GB/T 35912-2018、OIE 标准
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文献和实验猪蓝耳病病毒欧洲株(PRRSV-E)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
唾液或鼻咽拭子测试对于呼吸道疾病的病原体检测至关重要,未来将越来越多地用于Covid疫苗接种后的免疫检测。在这种情况下,鼻咽拭子或唾液样本的潜在高传染性通常会导致用户危险和相关的监管障碍。然而,对于唾液和鼻咽拭子检测如 SARS-CoV-2 抗原快速检测,安全设计如采用SafetyTector™ S 病毒灭活缓冲液则能很容易即可实现。 CoViD-19大流行突显了良好的诊断方法在控制公众传染病方面的重要性。除了使用核酸扩增检测 (NAT),如现在广为人知的聚合酶链式反应 (PCR)进行早期
某些局部地区流行。而HIV-1的M组病毒呈全球性流行。到目前为止,全球流行的绝大多数毒株是HIV-1M组中的A.C亚型毒株,接着是B亚型毒株,然后是A/E和A/G亚型重组毒株。进一步的分子流行病调查表明,在非洲几乎流行了HIV的所有亚型,但以A和C亚型为主,同时,也正由于众多亚型的共流行,那里也是发生病毒重组最多的地方。在北美、欧洲和澳大利亚,B亚型仍然是最常见的亚型,虽然M组的其它几个亚型、甚至O组病毒已经在美国和欧洲几个国家有报道,但进一步的现场流行病学调查证实,这些人中的大多数是来自非洲的移民
法和 Chelex 树脂法阳性检出率仅为吸附柱核酸纯化法的 52. 78% 和 55. 56%。在阳性标本中,同一标本的定量值也较吸附柱核酸纯化法低 1-2 lg 拷贝 /mL。 ②该系统用于检测的每份血清标本量较大。CAP-CTM 试剂盒用于检测的每份血清量达 650 uL,而国产 HBV DNA 检测试剂盒用于检测的血清标本量一般仅为 50-100 uL,但两者提取到的待测 HBV DNA 产物容积一般均为 50 uL。而且,由于反应管体积的限制,进行 PCR 检测时只能再取其中的 2-5 uL
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