金黄色葡萄球抑菌圈实验服务

用于定性/半定量评价待测药物、植物提取物、抗菌肽、纳米材料等对被测菌株的体外抑制效果，测量抑菌圈直径进行判读。

基本原理

• 制备均匀含菌琼脂平板(MH 琼脂最常用)
• 在平板表面打孔或贴药敏纸片，加入待测样品
• 样品中抑菌成分在琼脂中扩散形成浓度梯度
• 最低抑制浓度以下区域细菌不生长 → 出现透明抑菌圈(Zone of Inhibition, ZOI)
• 抑菌圈直径与样品抑菌活性正相关(同一菌株、同一培养基条件下可比)

⚠️ 抑菌圈只能说明体外抑制，不等于体内药效；不区分抑菌/杀菌(需配合 MBC 实验)。

常规检测方法

实验材料与条件(常规)

• 菌株：S. aureusATCC 25923(质控推荐)、临床分离株(MRSA 可选)
• 培养基：Mueller–Hinton Agar(MHA)，pH 7.2–7.4;严控琼脂厚度(4 ± 0.5 mm)
• 菌液浓度：0.5 McFarland(≈1–2×10⁸ CFU/mL)，用生理盐水调，再 1:100–1:150 稀释涂布
• 样品：溶解于合适溶剂(DMSO、乙醇、PBS)，设溶剂对照
• 阳性对照：苯唑西林/青霉素 G/庆大霉素纸片(视菌株耐药谱)
• 培养条件：37℃，18–24 h 避光培养

基本操作流程(以打孔法为例)

1. 菌悬液制备：活化菌株 → 调 0.5 McFarland → 稀释后与 45℃ MHA 混匀或均匀涂布平板，待吸干
2. 制孔：无菌打孔器打 Ø 6–8 mm 孔，去除琼脂栓(避免底破)
3. 加样：

• 待测样品(原液/梯度浓度)50–100 µL/孔
• 阳性对照(标准抗生素)、阴性对照(溶剂/PBS)

4. 预扩散：4℃ 静置 1–2 h(可选，减少边缘效应)
5. 培养：37℃ 倒置培养 18–24 h
6. 测量：游标卡尺测抑菌圈外径(含孔/纸片)，记录均值(mm)

送样常见要求

1. 样品：≥ 100 mg 或 ≥ 1 mL 液体，明确溶剂、浓度、pH

2. 要求说明：

• 测试菌株(ATCC 25923 / MRSA / 自选)
• 方法偏好(纸片 / 打孔 / 牛津杯)
• 是否需梯度浓度、MIC 配套

3. 对照：实验室一般自带 ATCC 菌株 + 阳性抗生素对照

型应用场景

1. 天然产物 / 中药提取物体外抑菌初筛
2. 新型抗菌材料(涂层、纳米颗粒浸提液)评价
3. 消毒剂/防腐剂效能验证
4. 菌株耐药性初筛