鹅流感病毒通用型（GIV-U）核酸检测试剂盒（荧光PCR法)

鹅流感病毒通用型（GIV-U）核酸检测试剂盒（荧光PCR法)

基本信息
产品名称：鹅流感病毒通用型（GIV-U）核酸检测试剂盒（荧光 PCR 法）
英文名称：Goose Influenza Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)
品牌：烜雅生物
货号：XY-PCR120Y
包装规格：50T / 盒
用途：科研用途，用于鹅流感病毒的定性/定量检测

预期用途
鹅流感由 A 型流感病毒致病性亚型引起，主要感染 30 日龄内小鹅，发病率与死亡率高（50%-90%）。
本试剂盒适用于拭子、气管、肺、脑、肠、肝、脾、肾、心等样本中鹅流感病毒通用型核酸的定性/定量检测，为鹅流感感染提供病原学依据。

检验原理
采用实时荧光 RT-PCR 技术，针对鹅流感病毒（A 型）高度保守的 **M 基因（基质蛋白基因）** 设计特异性引物与 TaqMan 荧光探针。
一步法完成反转录与 PCR 扩增，探针与靶序列结合后释放荧光信号，仪器实时监测荧光强度，Ct 值≤35 判定阳性，可快速定性检测病毒 RNA。

试剂组成（50T / 盒）
组分    规格
RT-PCR 反应液    1.0mL×1 管
酶混合液    50μL×1 管
阳性对照（GIV-U RNA）    50μL×1 管
阴性对照（无酶水）    250μL×1 管

储存条件及有效期
保存：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤5 次）。
运输：干冰或冰袋低温运输。
有效期：12 个月（未开封）。

样本要求
样本类型：喉气管拭子、组织脏器（肺、脑、肝等）。
采集：无菌操作，组织样本 10-20mg，拭子置于保存液中。
保存：2-8℃≤24h；-70℃长期保存，冻融≤3 次。
运输：低温密封运输，防止污染与降解。

操作流程
核酸提取：用病毒 RNA 提取试剂盒处理样本，获取 RNA。
试剂准备：融化试剂、混匀离心，配制反应体系（反应液 17μL + 酶液 1μL + 引物探针 2μL + 模板 5μL，总体系 25μL）。
PCR 扩增：
反转录：42℃ 15min
预变性：95℃ 3min
循环：95℃ 10s→58℃ 30s（收集 FAM 荧光），40 个循环。
结果判读：
阳性：Ct≤35，典型 S 型扩增曲线。
阴性：无扩增曲线或Ct>35。
无效：阴性对照出现扩增，需重新检测。

性能指标
灵敏度：最低检测限 **≤10 拷贝 / 反应 **。
特异性：与禽流感 H5/H7/H9、新城疫、鹅副黏病毒等无交叉反应。
精密度：批内 / 批间Ct 值变异系数≤10%。
线性范围：10¹-10⁷拷贝 / 反应，线性相关系数R²≥0.99。

适用仪器
实时荧光定量 PCR 仪：ABI 7300/7500、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler 480、博日 SLAN 等。

注意事项
分区操作（样本处理、试剂配制、加样），防止交叉污染。
试剂避光保存，避免反复冻融，不同批号不可混用。
实验后用 10% 次氯酸-钠或 75% 酒精消毒工作台，紫外灯照射 30min。
所有废弃物按生物安全规范处理。