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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Wash Solution 2 for in situ Hybridization
- 库存:
现货
- 供应商:
上海圻明
- 规格:
250 mL
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文献和实验/m(7)设备:烤箱,CO2 培养箱,倒置显微镜,玻璃载玻片(经洗涤,180℃干烤或15磅高压灭菌20min,原位杂交专用盖玻片,温箱,加样器和吸头等。 [操作步骤](1)在37℃5% CO2 条件下将细胞加在处理的载玻片上,用培养基培养,时间通过预实验确定;(2)细胞长好后,用洗涤液洗2分钟×3次,室温下将其放入细胞固定液中固定30-60min,蒸馏水洗涤;(3)室温下用洗涤液充分洗涤固定细胞,(干燥后-20℃冰冻保存2周以上)(4)杂交前将固定的细胞进行如下处理;依次在70%,90
锅,加样器,吸头,染色缸等 【操作步骤】 (1) 用地高辛标记DNA探针,参见上面介绍的“斑点杂交法测定培养细胞IL-2 mRNA的含量”; (2) 准备杂交液; (3) 临用前,将DIG标记的DNA探针在80℃加热10分钟,迅速置冰浴中变性后,将其加入杂交液中,至终浓度5μg/μl; (4) 将10-20μl杂交混合液(杂交液加变性探针)加入到固定并增加了通透性的细胞上,盖上专用原位杂交盖玻片
I采用了显色法,使用显色底物 NBT/BCIP;而Starter Kit II选用化学发光法底物CSPD。 如果您用来合成探针的DNA模板的量比较少或是质量不够高的时候,建议您使用PCR DIG Probe Synthesis Kit。该试剂盒专用于制备高灵敏度的杂交探针,例如单拷贝的基因。其另一个特点就是实验中无需定量斑点检测过程,通过定量凝胶电泳就可以快速确定PCR标记探针的效率。
技术资料暂无技术资料 索取技术资料






