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小鼠蛋白激酶Bα(PKBa)ELISA试剂盒

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  • ¥1500 - 2200
  • 抚生已认证
  • 0.156ng/mL-10ng/mL
  • 0.078ng/mL
  • A115841
  • 国产
  • 2026年06月14日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 供应商

      上海抚生

    • 库存

      20

    • 灵敏度

      0.078ng/mL

    • 样本

      血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本

    • 标记物

      血清/血浆

    • 适应物种

      大鼠、小鼠、人、植物

    • 应用

      ELISA试剂盒

    • 检测方法

      ELISA法

    • 检测范围

      0.156ng/mL-10ng/mL

    • 规格

      48T/96T

    规格:48T产品价格:¥1500.0
    规格:96T产品价格:¥2200.0
    检测原理:
    通过特异性抗小鼠PKBa单克隆抗体包被于微孔板,与样本中的PKBa结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后,形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质,加入TMB底物显色,HRP催化TMB转化为蓝色,酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与PKBa含量成正比,酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品浓度。
    性能参数:
    产品名称:小鼠蛋白激酶Bα(PKBa)ELISA试剂盒
    英文名称:Mouse PKBa ELISA Kit
    产品规格:48T/96T
    检测样本:血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本。
    检测范围:0.156ng/mL-10ng/mL
    灵敏度:0.078ng/mL
    ‌特异性‌:与人其他细胞因子无交叉反应。
    ‌有效期‌:6个月(2-8℃保存)。
    检测流程:
    1、固相抗体包被‌
    微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体(捕获抗体),该抗体能专一识别并结合小鼠蛋白激酶Bα(PKBa)中的特定表位。
    2、样本加入与抗原结合‌
    将待测样本(如血清、血浆或细胞培养上清)加入微孔中,样本中的PKBa会与包被抗体结合,形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
    ‌3、酶标二抗结合‌
    加入HRP(辣根过氧化物酶)标记的第二抗体(检测抗体),该抗体识别PKBa的另一个独立表位,从而形成“捕获抗体-PKBa-检测抗体”的三明治结构。
    4、显色反应‌
    洗涤去除未结合的酶标抗体后,加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物,在酸性终止液(如硫酸)作用下变为黄色。
    5、定量分析‌
    使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),颜色深浅与样本中PKBa浓度呈正相关。
    数据及参考曲线:
    校准品浓度(ng/mL) 10.00 5.00 2.50 1.25 0.63 0.31 0.16 0.00
    OD450/630值 2.729 1.555 0.867 0.498 0.299 0.173 0.097 0.050
    校正OD值 2.680 1.506 0.817 0.449 0.249 0.123 0.048 0.000

    产品细节图片1

    操作步骤:
    .试剂准备

    将试剂盒平衡至室温(20-25℃),浓缩洗涤液按 1:20 稀释备用。
    标准品按说明书进行梯度稀释,配制系列浓度标准曲线溶液。
    .实验流程
    加样:设置空白孔、标准孔、待测样品孔,空白孔仅加稀释液,其余孔分别加入标准品或待测样品,37℃孵育。
    加酶标抗体:除空白孔外,每孔加入酶标抗体,轻轻混匀,37℃避光孵育。
    洗涤:弃去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后甩干,重复洗涤 4-5 次,最后拍干残留液体。
    显色:每孔加入 TMB 显色液,37℃避光孵育,孔内呈现蓝色。
    终止:每孔加入终止液,混匀后颜色由蓝色转为黄色。
    检测:在 450nm 波长下测定各孔 OD 值,15 分钟内完成读数。
    .关键提示
    实验全程严格控温,孵育时使用封板膜避免蒸发。
    洗涤需充分,否则易造成高背景、结果偏差。
    显色液需避光,终止顺序与加样顺序保持一致,确保充分混匀。
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