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种属 | 人 |
组织来源 | 正常人脂肪组织 |
传代比例 | 1:2传代 |
完全培养基配置 | 基础培养基500ml;生长添加剂5ml;胎牛血清50ml;双抗5ml |
简介 | 前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化了的前体细胞,它的存在和作用持续于人的一生,与肥胖及Ⅱ型糖尿病都有密切的关系。近年来,人们对脂肪细胞有了更深入的认识,它不仅是单纯的能量贮存器官,还通过内分泌、旁分泌、自分泌和胞内分泌等途径,与其他神经内分泌和免疫器官形成广泛联络的神经一内分泌一免疫网络,通过各种脂肪细胞因子发挥众多的生理和病理作用。同时,脂肪组织还是多能干细胞的重要来源。因此,建立人前脂肪细胞培养体系,研究其脂肪沉积与组织发育机理,具有重要的理论与实践意义。 |
形态 | 成纤维样细胞样 |
生长特征 | 贴壁生长 |
细胞检测 | 前脂肪细胞因子-1(Pref-1)免疫荧光染色为阳性疫荧光鉴定,细胞纯度可达90%以上,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 |
倍增时间 | 每周 2 至 3 次 |
换液频率 | 2-3天换液一次 |
培养条件 | 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 |
冻存条件 | 冻存液:90%FBS,DMSO 10%, 或使用非程序冻存液: |
产品使用 | 仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |







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文献和实验吸管反复吹打使组织块分散,然后通过孔径25μM(200目)的筛网过滤,收集滤液和未过滤的组织块。5、将滤液以600g离心5分钟弃上清,加入原代培养的基础培养基制成细胞悬液。6、将未滤过的组织按照上述过程再处理一次,将俩次获得的细胞悬液混匀计数,按照104个/cm2的密度接种于培养瓶里,于37度,5%CO2培养箱中培养。接种12-16小时基本贴壁。在增殖状态下的前脂肪细胞可以使用胰蛋白酶消化的方法传代,并且可以冻存和复苏。
,收集滤液; ⑤ 将最后得到的滤液离心(700g,7—10min)。吸弃漂浮的脂肪细胞和消化液; ⑥ 用培养液a清洗细胞,离心(700g,7min)。将细胞团制成悬液,再离心。最后,将细胞沉淀用培养液a重新制成细胞悬液。 3. 原代培养; ① 用培养液a调节细胞密度。将细胞以1.5×104个/cm2 的密度接种于培养板中; ② 24h后,用DW培养液彻底清洗细胞,除去培养物中残留的胎牛血清和未贴壁的细胞(主要为红细胞); ③ 换入培养液b,在37℃、5%CO2 培养箱中培养
甲腺原氨酸(T3 )200pmol/L; 8. 筛网:孔径为25μm的尼龙网筛。 实验方法: 1. 取材 ① 取用普通食物喂养的4周龄雄性大鼠,乙醚麻醉后断头处死; ② 在无菌条件下从附睾周围切取脂肪垫,放入培养皿中。尽量除去血管。然后用清洗液冲洗3次; 2. 分离细胞 ① 充分剪碎所取脂肪细胞。然后放入消化液中,37℃水浴中振荡消化40
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