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- DM-QT46694
- 上海
- 2026年05月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海笃玛生物科技有限公司
- 库存：
999
- 灵敏度：
咨询
- 样本：
体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等
- 标记物：
电询
- 适应物种：
其它
- 应用：
科研实验
- 检测方法：
双抗夹心法
- 检测范围：
电询
- 规格：
96T/48T
| 规格： | 96T | 产品价格： | ￥1860.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 48T | 产品价格： | ￥1380.0 |
鱼（Fish）p300乙酰转移酶（p300-HAT）ELISA检测试剂盒
该试剂盒仅用于科研实验
产品货号：DM-QT46694
产品规格：48/96T
一、ELISA 检测原理
ELISA（酶联免疫吸附测定）核心是抗原 - 抗体特异性结合 + 酶促显色反应，通过颜色深浅反映待测物浓度。常用类型及原理：
1. 双抗体夹心法（测大分子抗原 / 蛋白）
固相包被捕获抗体 → 加入样本（待测抗原）→ 结合酶标检测抗体 → 加底物显色 → 吸光度与抗原浓度正相关。
2. 间接法（测抗体）固相包被抗原 → 样本中待测抗体结合 → 加酶标二抗 → 底物显色 → 吸光度与抗体浓度正相关。
3. 竞争法（测小分子抗原 / 半抗原）待测抗原与酶标抗原竞争结合有限抗体 → 待测物越多，显色越浅 → 吸光度与浓度负相关。
二、试剂盒的组成
三、ELISA实验所需材料
（一）试剂盒本身（核心）
1. 预包被酶标板（96 孔）
2. 标准品（梯度浓度）
3. 酶结合物（酶标抗体 / 酶标抗原）
4. 样本稀释液
5. 洗涤液（浓缩液，使用前稀释）
6. 显色底物液（A、B 液或单液）
7. 终止液
8. 封板膜 / 封板胶
（二）样本相关
1. 待测样本（血清、血浆、细胞上清、组织匀浆等）
2. 样本处理试剂（视样本类型）：
抗凝剂（EDTA、肝素、柠檬酸钠等）
蛋白酶抑制剂（如组织样本）
裂解液、匀浆缓冲液等
（三）仪器设备
1. 酶标仪（450 nm 为主，部分需双波长）
2. 洗板机（推荐）或洗板瓶 / 排枪
3. 移液器（0.5–10 μL、10–100 μL、100–1000 μL）
4. 移液器吸头（带滤芯更佳）
5. 涡旋振荡器
6. 离心机（样本处理用）
7. 恒温培养箱 / 水浴（37℃ 孵育用）
8. 冰箱（2–8℃、-20℃）
（四）耗材与辅助用品
1. EP 管、冻存管
2. 一次性手套、口罩
3. 吸水纸 / 滤纸
4. 计时器
5. 去离子水 / 蒸馏水（用于洗涤液稀释）
6. 废液缸、吸水纸
（五）可选 / 特殊实验材料
1. 封板膜 / 封板胶
2. 振荡器（微孔板摇床）
3. 多道移液器（8/12 道）
4. 加样槽
5. 微孔板封口膜、铝箔（避光）
四、试剂准备的注意事项
1.所有试剂按说明书指定温度保存（2–8℃ 或 -20℃）
2.避免阳光直射，酶结合物、底物需避光
3.不同批号试剂不可混用
4.加样前检查试剂是否浑浊、沉淀、变色，异常则弃用
5.所有试剂开盖后尽快使用，剩余按要求保存
五、结果计算（通用流程）
1. 数据处理
（1）扣除空白孔 / 本底孔吸光度（OD），得到校正 OD 值。
（2）以标准品浓度为 X，校正 OD 为 Y，做标准曲线（常用四参数拟合 4PL）。 2.浓度计算
（1）样本 OD 代入标准曲线，得到理论浓度 C₀。
（2）若样本经稀释，最终浓度：C=C0×稀释倍数
2. 有效性判定（常见）
（1）空白 OD 通常 ≤ 0.1；
（2）标准曲线 R² ≥ 0.98；
（3）质控（QC）在可接受范围；
（4）样本 OD 超出曲线上限 / 下限时需重新稀释 / 浓缩复测。
六、示例（双抗体夹心法）
标准品浓度：0、10、20、50、100、200 pg/mL
测得 OD：0.05、0.12、0.25、0.58、1.10、1.95
校正后 OD：0、0.07、0.20、0.53、1.05、1.90
拟合曲线后，某样本校正 OD=0.35 → 曲线读出 C₀≈30 pg/mL若样本稀释 5 倍，则最终浓度 = 30 × 5 = 150 pg/mL。
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文献和实验【求助】P53的翻译后修饰都有哪些？ 怎样验证其修饰后与靶标启动子的结合活性的变化？
蛋白质功能的一个主要机制，p53在多个位点上可被磷酸化、顺-反异构化、乙酰化、泛素化、甲基化、糖基化等修饰，从而显示其生物学重要性。这种显示细胞或组织特异性并依赖细胞周期位置的多重修饰，是一种复杂的调节方式，随着细胞对DNA损伤、增殖、老化等产生的细胞信号的反应而发生波动。 磷酸化修饰 P53的磷酸化在多数情况下与蛋白质的稳定性有关。p53 N-末端的三个位点Ser15、Thr18、Ser20磷酸化后，使p53和其主要的负性调节因子MDM2之间的相互作用消失，而和乙酰转移酶
巴豆酰化（Lysine Crotonylation, Kcr）存在于多种生物体的核心组蛋白和部分非组蛋白中，与其他类型的翻译后修饰(PTM) 类似，蛋白巴豆酰化（Lysine Crotonylation, Kcr）是一种可逆修饰，有促进基因表达、调控等重要功能。在蛋白质巴豆酰化中，最为常见的是赖氨酸巴豆酰化，由组蛋白乙酰转移酶 (HAT)、P300/CBP、PCAF 和 MOF 负责大多数巴豆酰化反应，而组蛋白去乙酰化酶HDAC1/2/3和SIRT1/2/3 逆转这些反应
基因和去乙酰化酶基因均已被克隆。P/CAF为人类中被克隆的乙酰转移酶基因，研究表明, P/CAF基因产物与已知的转录共激活子(coactivator)CBP和p300结合, 后者与转录因子（例如CREB, c-JUN和FOS)结合, 因此, Sternglanz(1996)等〔26〕认为, 乙酰转移酶通过与转录因子和共激活子结合, 催化启动子区核心组蛋白的乙酰化。 5 核小体与基因调控 核小体是染色质的基本结构单位。体内外实验均证实, 核小体为基因转录的一个通用抑制子(general
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