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- 2026年04月15日
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- 文献和实验
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文献和实验,Irvine Scientific,Santa Ana,CA)+2%新鲜小牛血清＋0.1%叠氮钠 A、PI缓冲液 ：用缓冲液将PI溶解至终浓度为1mg/ml中，于4℃下密封避光保存1个月。 B、PI浓缩液 ：用缓冲液将PI溶解至终浓度为500mg/ml，于4℃下密封避光保存。我们已经检测过将PI浓缩液放置数月后，并无观察到染色活性的丢失。 Ⅱ、方法： 将样品细胞按程序描述的方法用FITC标记的单克隆抗体进行单色染色。 A、在最后的洗涤步骤后，将样品细胞悬浮于PI缓冲液中，于4℃下密封避光
蒸汽灭菌20分钟，室温保存。 2.原代血管内皮细胞的获取与培养 按Jaffe等人〔1〕的方法加以改进。在无菌条件下取新生儿脐带，剪去钳痕和凝血块阻塞部分，找到脐静脉。一端插上带有胶管的玻璃管结扎固定，经胶管接注射器，用生理盐水灌洗。待脐静脉内的残血除净后，用37℃ PBS，冲洗两次，将另一端用铁夹夹闭，向脐静脉内灌注0.25%胰蛋白酶8～10ml，夹闭胶管放入已灭菌的大平皿中。37℃孵育12min，在此期间经常翻动脐带使酶溶液在血管内流动以促使内皮细胞均匀与酶接触。取出脐带后轻轻挤压管壁，将含有内皮
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