Thermo Scientific (Alfa Aesar)

非放射性Dig－dUTP

试剂溶于缓冲液中，封阻试剂不会快速溶解，因此应提前1小时配制此溶液，将试剂溶于50～70℃，此溶液保持混浊。 缓冲液Ⅲ：100 mmol/L Tris Cl；100mmol/L NaCl；50mmol/L NaCl；50mmol/L MgCl2，pH9.5(20℃)。 缓冲液IV：10mmol/L Tris Cl；1 mmol/L EDTA，pH 8.0(20℃)。 显色溶液（新鲜配制）：10ml缓冲液Ⅲ中，加 45μl NBT溶液和 35μl X-磷酸盐溶液。 2. 器材 常规实验室

从患有利什曼病的狗的结肠中分离细胞并做流式细胞分析

器） 6. 细胞培养离心机（Thermo Scientific的multifuge X3R） 7. 巴斯德管 8. FACSVantage ®（Becton-Dickinson, San Diego, CA, USA） 9. 结肠镜钳 实验步骤   1. 移取结肠活体穿刺组织用于分离固有层细胞。在培养皿中用不完全的RPMI彻底清洗全部结肠组织，将片段转移到另一个含有10mL完整RPMI的培养皿中，冰浴。

反转录过程中需要考虑哪些因素？

. (Brochure) 4.Thermo Fisher Scientific (2015) SuperScript IV Reverse Transcriptase. (White paper) 5.Zhang J, Byrne CD (1999) Differential priming of RNA templates during cDNA synthesis markedly affects both accuracy and reproducibility of quantitative