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- 文献和实验
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文献和实验试剂溶于缓冲液中,封阻试剂不会快速溶解,因此应提前1小时配制此溶液,将试剂溶于50~70℃,此溶液保持混浊。 缓冲液Ⅲ:100 mmol/L Tris Cl;100mmol/L NaCl;50mmol/L NaCl;50mmol/L MgCl2,pH9.5(20℃)。 缓冲液IV:10mmol/L Tris Cl;1 mmol/L EDTA,pH 8.0(20℃)。 显色溶液(新鲜配制):10ml缓冲液Ⅲ中,加 45μl NBT溶液和 35μl X-磷酸盐溶液。 2. 器材 常规实验室
器) 6. 细胞培养离心机(Thermo Scientific的multifuge X3R) 7. 巴斯德管 8. FACSVantage ®(Becton-Dickinson, San Diego, CA, USA) 9. 结肠镜钳 实验步骤 1. 移取结肠活体穿刺组织用于分离固有层细胞。在培养皿中用不完全的RPMI彻底清洗全部结肠组织,将片段转移到另一个含有10mL完整RPMI的培养皿中,冰浴。
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