DMEM/F-12 (1:1) 培养基

外泌体专用培养基 VS 去外泌体血清，谁赢了？

，添加新培养基（50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基）；   3. 阶段培养二：待细胞在梯度培养一中生长汇合度约为 70～80% 时，移去原有的 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基；   4. 使用 1X PBS 溶液将细胞润洗 2～3 次；   5. 加入外泌体专用无血清培养基继续培养 24～48 h，待细胞汇合度到 90%～100% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌体提取实验。   *注：若使用 DMEM、1640 等常规培养基，会导致培养

如何选用培养基

培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养，各种目的无血清培养的首选是AIM V培养基（SFM）。在开始进行新的细胞培养时，可以参考下表所列的条件：细胞系 细胞类型 种 组织 推荐使用的培养基293 成纤维细胞 人 胚胎肾 MEM, 10% 热灭活马血清3T6 成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清A549 上皮细胞 人 肺癌 F-12K, 10%胎牛

培养基

并开始分裂增殖，第3天已长成较密单层，细胞贴壁均匀，形态清晰，呈多边形和梭形，细胞间略有空隙，细胞数为7.5 x 106个／ml。在此后转瓶培养的60 d内细胞数保持稳定，无明显增加和减少，无脱落，无明显形态变化，培养液中HBsAg滴度稳定在1：128～1：512之间。 而使用传统DMEM细胞培养基，只有30％和40％的细胞伸展，至第4天才长成较密单层，小方瓶与双层转瓶结果相同。至30 d 时已长成较厚的复层，并开始大片脱落，细胞数明显减少，HBsAg滴度降低，最低降到1：32 。此后细胞开始重新