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细胞迁移与侵袭实验
一、项目介绍
细胞迁移与侵袭是肿瘤转移、伤口愈合、胚胎发育及免疫应答等生理病理过程中的核心环节。虽然两者密切相关,但其生物学机制存在本质区别:
· 细胞迁移:指细胞在趋化因子或物理信号的刺激下,沿特定方向移动的能力。这主要模拟了细胞在相对开放基质上的运动过程(如伤口愈合)。
· 细胞侵袭:指细胞在迁移的基础上,通过分泌基质金属蛋白酶降解细胞外基质,并穿越基底膜屏障的能力。侵袭是肿瘤细胞发生远端转移的关键步骤,具有侵袭能力的细胞必然具备迁移能力,但反之未必。
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二、服务范围
Transwell细胞迁移实验
原理:利用带有微孔(通常为8μm孔径)的聚碳酸酯膜将培养板分隔为上下两室。上室接种无血清细胞悬液,下室加入含血清或趋化因子的培养基,建立化学浓度梯度,诱导细胞穿过微孔迁移至膜下表面。
服务细节:
趋化性分析:评估不同浓度血清或特定因子对细胞定向迁移的诱导作用。
染色与计数:固定穿膜细胞后,采用结晶紫或吉姆萨染色,显微镜下随机选取视野计数。
适用:研究细胞的垂直迁移能力及趋化运动机制。
Transwell细胞侵袭实验
原理:在Transwell小室上室膜表面铺覆一层基质胶,模拟体内的细胞外基质屏障。细胞必须分泌酶类降解基质胶,才能穿过微孔到达下室。
服务细节:
基质胶铺板:严格在冰上操作,使用Matrigel基质胶均匀覆盖微孔膜,模拟体内基底膜环境。
侵袭能力评估:检测细胞突破物理屏障的能力,这是评价肿瘤恶性程度和转移潜能的“金标准”。
适用:肿瘤转移机制研究、抗侵袭药物筛选。
三、应用领域
· 肿瘤学研究:评估癌细胞的转移潜能,筛选抑制肿瘤侵袭转移的靶向药物。
· 创伤修复:研究成纤维细胞、血管内皮细胞在组织修复过程中的迁移行为。
· 免疫学:分析免疫细胞(如巨噬细胞、中性粒细胞)对炎症因子的趋化响应。
· 药物开发:评价新型化合物或中药提取物对细胞运动及基质降解能力的抑制效果。
四、送检要求
1)复苏好的细胞常温运输;冻存管干冰运输;药物根据特性常温或者干冰运输。
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文献和实验使Matrigel聚合成凝胶...阅读全文 Transwell的其他应用的实验步骤 1.Transwell肿瘤细胞迁移实验过程与Transwell侵袭实验基本一致,不同的只是不需要铺Matrigel。个人认为,由于没有基质胶的阻挡,细胞穿过膜的速度较侵袭实验明显加快,所以细胞量要更大。我做侵袭实验的细胞密度是1×105,而迁移实验的密度是1×106。另外,下层培养液的FBS浓度也可适当下调,我做侵袭实验的浓度是5%,迁移实验的浓度是2.5%。2.Transwell上皮细胞培养步骤做了一段时间的原代
我的课题涉及 Transwell 侵袭实验,因此在这里和大家分享 Transwell 侵袭实验。实验用品01 Transwell 小室我用的是 ECM554,用完后擦去基质胶,再用胰酶和 75% 酒精泡,可以把膜洗得很干净,用前用紫外里外都照 30 min。处理方法:用棉签轻轻擦去胶和反面细胞,清水冲洗,超声清洗,低档,30 min,清水 3×5 min,蒸馏水 3×5 min,室温凉干,用前紫外线小室正面 3 h,反面 6 h,微波,低火 10 min×2。因为我买的是铺好胶的,所以没买
基于阻抗的rtca细胞分析技术应用--Transwell侵袭实验
细胞 (MCF-7和HCC1806) 转移疗效的。 研究者通过比较划痕处理后细胞迁移的趋势和速度,发现Maestro Z系统能够轻松地将两种肿瘤细胞系的差别区分开来。HCC1806细胞相对于MCF-7而言有更强的迁移能力, 这点能够和临床上观察到的三阴乳腺癌肿瘤细胞的高转移能力相呼应。此外,她们还发现MaestroZ系统对于不同抗转移MCP在作用效应和动态上的微小差别很敏感,证实了它在评估抗转移治疗疗效方面的价值。若要了解更多,可参考:(page_2 - (axionbio.cn))
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