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小RNA转染试剂

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  • GeneCreate
  • CT0101
  • 中国武汉
  • 2026年04月07日
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      200

    • 英文名

      Pepincell™ Transfection Reagent for siRNA

    • 保质期

      2年

    • 供应商

      武汉金开瑞生物工程有限公司

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      500μL/1mL

    规格:500μL产品价格:¥650.0
    规格:1mL产品价格:¥1200.0
    小RNA转染试剂

    小RNA转染试剂

     


     

    产品编号 规格 数量
    CT0101   500μL   1mL       

    实验原理

    Pepincell™ Transfection Reagent for siRNA (货号 CT0101)  是一款新型性能优良的 siRNA 专用转染试剂, 可高效将siRNA 的进行胞内递送和介导基因沉默 。该产品创造性的改良了聚合物与小 RNA 的结合方式, 与常规阳离子聚合物相比具有更低的离子强度特性, 毒性极低, 同时具有稳定性好 、转染简单、易行 、重复性好等优点。

    产品优势

    高效转染:siRNA专用,基因沉默效率 >90%(HEK 293细胞)

    低毒性:改良聚合物结构,离子强度低,对细胞更友好

    操作简便:稳定性好,重复性高

    适用范围广:对细胞覆盖度容忍度高,40% 覆盖率仍可高效转染。

    适用于难转染细胞:如原代细胞

    实验流程

    小RNA转染试剂操作指南

    Timeline Procedure

    Component

    96-well 24-well 6-well
    DAY 0 Cell cuLture

    The cell were cuLtured for 12-24h, cell density 50-60%

    Adherent cell
    inocuLation

    1-4x 10^4

    0.5-1x 10^5 0.25-0.5x 10^6
    DAY 1 Transfection reagent dilution

    Dilute transfection reagent with PBS and Vortex

    PBS

    9.2μL

    46μL 234μL

    Transfection reagent

    0.4μL

    2μL 8μL
    siRNA-Complex preparation Add siRNA to Transfection reagent(diluted)

    Transfection   reagent (diluted)

    9.6μL

    48μL 242μL
    siRNA (10 uM stock solution)

    0.4μL (4 pmol)

    2μL (20 pmol) 8μL (80 pmol)

    Total volume

    10μL

    50μL 250μL

    Vortex then Incubate at RT for 20 min

    siRNA-Complex dilution Dilute siRNA-Complex with Opti-MEM Reduced Serum Medium

    siRNA-Complex

    10μL

    50μL

    250μL

    Opti-MEM Reduced Serum Medium

    90μL 450μL 1750μL

    siRNA-Complex (diluted)

    100μL 500μL 2000μL

    Cell transfection

    Remove original mediumAdd siRNA-Complexdilutedto cells

    DAY 2-4

    Visualize/analyze transfected cells

    Incubate cells for 2-4 days at 37℃ then analyze transfected cells

    结果展示

    示例细胞:

    Pepincell™  Transfection Reagent for siRNA  转染 siRNA 干扰稳定表达 Luciferase  细胞系Luciferase  敲低效率:

    Cell lines

    Target gene Gene silencing efficiency

    HEK 293

    Luciferase >90%

    GL 261

    Luciferase

    4T1

    Luciferase >80%

    B16

    Luciferase
    1. 24 well plate transfected with 2 μL Transfection reagent & 20 pmol siRNA/well

    常见问题与解答

    Q1 :用100nM 的 siRNA 转染时只得到 50%沉默效率,我可以将 siRNA 的浓度增加到 200nM 甚至400nM 吗?

    增加 siRNA 的浓度一般不能改进沉默效率,高浓度的 siRNA 将可能导致去靶作用和对细胞的毒性。siRNA 的高基因沉默效率来自于合理的设计,在 100nM 甚至更低的浓度都可能有 75%的沉默效率。另外,低的转染效率会导致低的沉默效率,建议您更进一步优化 siRNA 的导入条件。

     

    Q2: siRNA 转染实验需要阴性对照吗?

    是,阴性对照是 RNA 干扰实验中不可缺少的。由于在超过 200nM 的浓度下,siRNA 有可能会导致非特异性的压力反应,在实验体系中必需设置阴性对照。它能够帮助我们确认基因表达水平的降低是否是序列特异性的 RNAi 的结果。由于 siRNA 的合成方法和工艺以及转染试剂等因素可能导致广泛的基因沉默现象。如果没有阴性对照,研究人员很可能错误地将广泛的、非特异性基因沉默当作由 RNAi 引起的基因特异性沉默。

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