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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
湖州申科生物技术股份有限公司
- 灵敏度:
3 ng/mL
- 检测方法:
酶联免疫吸附法
- 检测范围:
适用于测定CHO-K1细胞系表达产品中宿主细胞蛋白杂质残留
- 规格:
96测试/盒
中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO)是抗体、重组蛋白、疫苗等生物制品生产中广泛使用的动物细胞表达系统。在使用CHO宿主生产过程中,不可避免的会引入宿主细胞蛋白(HCP)杂质,即使较低残留水平下,HCPs也会存在免疫原性,降低产品蛋白稳定性等的风险。因此需对生物制品中残留的HCP进行定量分析,以保证纯化工艺的一致性和终产品的安全性。
该试剂盒专用于测定CHO-K1细胞系表达产品中宿主细胞蛋白杂质残留。抗CHO-K1 HCP多克隆抗体在山羊中产生,并使用CHO-K1 HCP亲和纯化,具有较高的抗体覆盖率。
| 线性范围 | 3-300 ng/mL |
| 定量限 | ~3 ng/mL |
| 专属性 | 与Sf9、HEK293T、E.coli BL21、P.pastoris等工程细胞基质宿主蛋白的交叉反应率低于1% |
| 抗体覆盖率 | 94.6% (IMBS-MS,Unique Peptide≥2) |
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文献和实验问:各位大虾小弟我最近一直在瞬转COS细胞分泌表达上清一直没有表达也浓缩过再做ELISA WB 都没有啊时间挺长了实在等不及了就想稳定转染cho-k1细胞系通过MSX来筛选加压25UM的MSX 结果还不到两个星期CHO全死了不知道怎么回事如果有表达的话应该是分泌表达的怎么我总是做不出来呢很是一个郁闷阿 质粒纯度和浓度都应该没问题希望做过这方面试验的高人指点一下到底哪里我还没有考虑到阿谢谢了答:提三点建议:1,用MSX筛选之前最好做预实验,摸出其最小有效浓度,然后用这个浓度去筛选阳性
,但也有力所不及的时候,比如分离培养法就不能检出支原体M. hyorhinis菌株的存在。 如果实在不想等这么久,或者希望在分离培养法的等待过程中先拿到初步结果,可以试一试酶学检测法、ELISA法、DNA染色法或PCR法。不过需要注意的是,上述检测方法都不能单独检出所有类型的支原体,而且灵敏度也没有分离培养法高,所以最好结合使用两种方法以获得最可靠的检测结果。 02 酶学检测法 酶学检测是将可疑样本添加到特定底物中,在这一体系内支原体的酶可以将ADP转化
。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在 43℃ 进行,但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应 4℃ 更为彻底,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜,以形成最多的沉淀。但因所需时间太长,在 ELISA 中一般不予采用。 5. 洗涤 洗涤在 ELISA 过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。ELISA 就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附
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