Hydroxystilbamidine 羟芪巴脒

产品描述

羟芪巴脒（Hydroxystilbamidine），又称为Fluoro-Gold™，用于DNA和RNA染色。与RNA作比较，与DNA结合后呈现出截然不同的荧光发射光谱。这一阳离子染料还常用作一种逆行神经元示踪剂。

产品特性

CAS NO.：223769-64-0

化学名：4-[2-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]ethenyl]-3-hydroxybenzenecarboximidamide bis(methanesulfonate)

同义名：Hydroxystilbamidine bis(methanesulfonate); 2-Hydroxystilbene-4,4′-dicarboxamidine bis(methanesulfonate);Fluoro-Gold™;羟基司替丁双（甲磺酸酯）；2-羟基二苯乙烯-4,4′-二羧氨基脒双；荧光金；氟金™；

分子式：C18H24N4O7S2

分子量：472.54

外观：黄色粉末

纯度：≥95%（HPLC）

溶解性：溶于H2O

Ex/Em：360/625nm

保存与运输方法

保存：-20℃干燥避光保存，有效期至少1年。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）Fluoro-Gold™是Fluorochrome, LLC.的注册商标。

2）荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作流程（组织学染色）

羟芪巴脒的使用基本与其他荧光示踪剂相同。主要区别是羟芪巴脒在染料注射后存活时间、工作浓度范围、组织处理和与其他组织化学技术兼容性几个方面更加灵活。比其他荧光示踪剂更耐褪色、更明亮和更持久。

1.染料浓度

1-10%的羟芪巴脒都得以成功应用。实验建议使用4%浓度。如果在注射位点发生不理想的坏死或标记太强烈，将浓度降低到2%。

2.染料注射

①压力注射：这可能是使用最频繁的用法。注射体系范围从0.05-1µl，典型为0.1-0.2µl。

②晶体：示踪剂的晶体可从微量移液枪的枪尖注射。

3.固定

虽然任何固定或不做固定都可，但含4%多聚甲全的PBS是最常使用的。含高浓度重金属（比如：锇，汞）的固定剂会淬灭荧光，而高浓度的戊二全（＞1%）也许增加背景荧光。

4.组织化学处理

含羟芪巴脒的组织可能依照任何通用的组织学技术来作处理。固定组织的冰冻切片最常使用。

5.联用技术

此处切片可能需进一步处理来做第一种标记比如放射性自显影、HRP组织化学术、免疫细胞化学、第二种荧光示踪剂、荧光复染等等。

6.裱贴、透化和盖片

切片通常裱贴在明胶包被的载玻片、空气干燥、浸在二甲苯内，之后用非荧光的DPX封片剂来封片和盖片。切片可能用分级纯来脱水，除非这一步与第二种染料不兼容。如果羟芪巴脒与荧光免疫细胞化学组合，之后切片需空气干燥，并且直接用DPX盖片。

7.观察和成像

羟芪巴脒（中性pH下激发为323nm，发射为620nm）可以用荧光显微镜（带宽波带的紫外激发滤片）来观察。当用中性pH缓冲液处理组织，发射光呈金色；而当用酸性pH缓冲液（比如pH 3.3）处理组织时，发射光呈蓝色。可以用数码机或胶片机拍摄（使用Ektachrome 200-400 ASA胶片进行彩色打印，或相当的速度胶片用于黑白打印）。绝大多数曝光时间范围从10~60s曝光，具体取决于物镜放大倍数和标记强度。30s曝光大概是平均的。多重曝光可能采用来同时观察羟芪巴脒和另一个示踪剂。因此，UV将与明场照明组合以同时定位羟芪巴脒和HRP或放射自显影的银粒。类似地，蓝光激发也可能联合使用同时观察FITC的绿色发光，而绿色激发光也可能用于同时观察碘化丙啶或溴化乙锭的红色发光。