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Fast 1st Strand cDNA Synthesis

Kit (for PCR/qPCR);快速一链cDNA合成试剂盒(用于PCR/qPCR)
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  • ¥200 - 1200
  • 经科
  • JK5438
  • 国产
  • 2026年03月23日
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    • 英文名

      Fast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (for PCR/qPCR)

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      上海经科化学科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      10T/100T

    规格:10T产品价格:¥200.0
    规格:100T产品价格:¥1200.0

    产品简介

    本产品在经典的反转录试剂基础上,优化了反应时间,总反应时长最快可低于6分钟,且具有稳定的检出率、特异性、产量保证,适合具有复杂的RNA模板、少量模板以及低拷贝基因的反转录。

    本产品反转录产物,可用于下游PCR或qPCR应用。试剂盒提供两种cDNA合成引物:Random Primers N6和Oligo (dT)18,用户可根据需要选择使用。

    产品储存

    -25℃~ -15℃保存,有效期1年。

    操作注意

    1. 所有操作均应在冰上进行,且操作过程应避免 RNase 污染。

    2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    3. 本产品仅作科研用途!

    操作说明

    一、含gDNA去除反转录步骤

    1. gDNA消化

    在RNase-free离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。42℃孵育2 min。

    组分

    使用量

    5×gDNA Digester Mix

    2 μL

    Total RNA or mRNA

    Total RNA:10 pg-5 μg

    mRNA:10 pg-500 ng

    RNase-free H2O

    Up to 10 μL

    【注】:建议Total RNA的投入量不超过2 μg。如果目的基因表达丰度低,可增加投入量至最多5 μg。

    2. 反转录体系配置

    组分

    使用量

    上一步反应液

    10 μL

    4×Fast cDNA Synthesis Mix (No Dye)

    5 μL

    Oligo d(T)18 Primers(50 μM) or Random Primers(50 μM)

    2 μL

    RNase-free H2O

    Up to 20 μL

    【注】:1)引物投入量可根据模板投入量调整,若下游实验为qPCR,可在体系中按推荐量添加 Random Primers;2)建议先加入4×Fast cDNA Synthesis Mix (No Dye)混匀后再加入反转录引物,以保证引物不受gDNA Digester影响;3)体系配制完成后,请用移液器轻轻吹打混匀。

    3. 反转录程序设置

    温度

    时间

    55℃

    5 min

    85℃

    5 sec

    二、不含gDNA去除反转录步骤

    1. 反转录体系配置

    组分

    使用量

    4×Fast cDNA Synthesis Mix (No Dye)

    5 μL

    Oligo d(T)18 Primers(50 μM) or Random Primers(50 μM)

    2 μL

    Total RNA or mRNA

    Total RNA:10 pg-5 μg

    mRNA:10 pg-500 ng

    RNase-free H2O

    Up to 20 μL

    2. 反转录程序设置

    温度

    时间

    55℃

    5 min

    85℃

    5 sec

    【注】:

    1)建议Total RNA的投入量不超过2 μg。如果目的基因的表达丰度低,可增加投入量至最多5 μg。

    2)引物投入量可根据模板投入量调整,若下游实验为qPCR,可在体系中按推荐量添加Random Primers; 

    3)对于高GC含量模板或者复杂模板,可将反转录温度提高到60℃。

    4)本产品可合成14 kb以下的cDNA序列,如需得到更长的cDNA产物,可适当延长反转录时间。

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    图标文献和实验
    该产品被引用文献

    本产品在经典的反转录试剂基础上,优化了反应时间,总反应时长最快可低于6分钟,且具有稳定的检出率、特异性、产量保证,适合具有复杂的RNA模板、少量模板以及低拷贝基因的反转录。

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