小鼠NGAL检测试剂盒 Mouse NGAL ELISA

小鼠NGAL检测试剂盒

Mouse NGAL ELISA Kit

简介：

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）属于脂质运载蛋白家族²。这类分泌型蛋白的特征在于：1) 能够通过β折叠片形成的结构保守口袋结合疏水性小分子；2) 可与特定细胞表面受体结合；iii) 能形成大分子复合物。NGAL拥有多个同义名称：最广为使用的当属脂质运载蛋白2（LCN 2）；近期学界采用铁载体蛋白（siderocalin）这一名称以凸显NGAL结合细菌铁载体的功能³。在小鼠中，NGAL最初以mRNA形式被鉴定为24p，随后又以24kDa超诱导蛋白（SIP24）或子宫运载蛋白（uterocalin）等名称被研究。

小鼠NGAL由含单个二硫键的180个氨基酸残基多肽链构成，计算分子量为20.9 kDa，但糖基化修饰使其在SDS-PAGE中的表观分子量增至24 kDa。在某些生理情况下，小鼠NGAL可与基质金属蛋白酶-9（MMP-9）共表达并形成复合物，但该复合物的连接机制尚不明确，因为小鼠NGAL不同于人类同源蛋白，其缺乏能形成分子间二硫键的第三个半胱氨酸残基。在成年小鼠体内，NGAL表达于中性粒细胞、子宫腔上皮和腺上皮细胞⁹，以及肺、脾脏、阴道和附睾中。在胚胎发育阶段及响应多种刺激时，NGAL可能在其他细胞类型中表达，例如特定肾细胞、LPS刺激的巨噬细胞¹¹、地塞米松诱导的L细胞，以及碱性成纤维细胞生长因子活化的成纤维细胞。此外，小鼠NGAL属于1型急性期蛋白，在体内松jie油炎症模型或体外TNF-α/地塞米松刺激下，肝细胞可分泌该蛋白。

除了上述情况下小鼠NGAL的表达外，在SV40或多瘤病毒感染后，小鼠肾脏细胞中NGAL会发生早期且显著的上调，这实际上是揭示NGAL存在及其在受损肾细胞中早期反应的证据多年后，这一发现被扩展到肾缺血后和肾毒性损伤的研究中。在肾缺血后早期的小鼠肾脏中，检测到NGAL mRNA和蛋白水平的显著上调，主要发生在近端肾小管细胞中；并且通过Western blotting技术，在缺血及顺铂诱导的肾毒性损伤后的小鼠尿液中，可以轻易检测到NGAL蛋白的升高。

研究还发现，在糖尿病肾病和梗阻性肾病的小鼠模型中，尿液中NGAL水平也出现升高。然而，关于小鼠尿液、血浆或血清中NGAL水平的定量数据仍较为缺乏，无论是基础状态下的水平还是肾损伤后的变化。大多数分析都采用了Western blotting方法，该方法除了在急性期反应诱导后¹³，通常无法在血清中检测到NGAL。

尽管如此，尿液中NGAL的测定似乎可能成为评估小鼠肾损伤、肾毒性及其他肾病模型的一个便捷的实验终点指标。

产品信息：

检测原理：

该检测方法是一种夹心ELISA法，在包被有大鼠抗小鼠NGAL单克隆抗体的微孔中进行。结合上的NGAL通过另一种生物素标记的大鼠单克隆抗体进行检测，并使用辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素和显色底物来完成测定。

产品应用：

1.急性肾损伤（AKI）研究：在缺血、缺氧或药物（如顺铂）诱导的小鼠模型中，早期检测尿液或血液中的NGAL，比肌酐更早反映肾小管损伤。

2.药物肾毒性评估：在临床前药物筛选中，通过监测尿液中NGAL水平的变化，评价候选化合物的肾脏安全性。

3.慢性肾病（CKD）机制研究：用于糖尿病肾病、梗阻性肾病等慢性模型中，动态监测生物标志物，评估疾病进展及干预效果。

4.炎症与应激反应研究：作为一种1型急性期蛋白，用于研究炎症刺激（如LPS、TNF-α）下，肝细胞或其他细胞中NGAL的表达调控。

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