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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
2-Amino-2-(2H-tetrazol-5-yl)acetic acid
- 库存:
999
- 供应商:
上海麦克林生化科技股份有限公司
- CAS号:
138199-51-6
- 规格:
100mg/250mg/1g
| 规格: | 100mg | 产品价格: | ¥4013.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 250mg | 产品价格: | ¥6998.0 |
| 规格: | 1g | 产品价格: | ¥18662.0 |
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文献和实验免疫印记技术(Western-blotting technique)
一、 概 述 原理 Western-blotting印记是将蛋白质经分离后从凝胶转移到固相支持物上,然后用特异性的抗体进行检测。 二、 材料和方法 (一) 材料 1. 质粒 pW425t+SO7 2. 宿主菌菌株 E.coli X51,-86℃保存 3. 培养基 LB基本培养基平板
条件下使样品变得又硬又脆,用刀劈裂样品,暴露观察面。因为是用刀劈裂的样品,断裂往往发生在细胞被冻结后较脆弱的部位,多数是沿细胞及细胞器 的膜裂开。由于断裂面是凸凹不平的,所以图像立体感强。冷冻断裂时,刀的作用在于劈裂,而不是切割,所以刀刃不必锋利,但不能有缺口、油污和水份,还需保持清洁干燥。冷冻复型的断裂操作要在真空中进行,是因为真空对热传导性差,能使样品较长时间维持在较恒定温度下进行断裂操作,同时也便于进行下步的蚀刻处理。仪器中进行断裂的最佳条件:真空度为133×10-5~3×40
,5%CO2 的培养箱中培养至细胞汇合度 70-80% 时进行传代。 3、吸去 MEFs 培养基,将 iPSCs 接种于明胶上,添加 10ml iPSCs(I)培养基,放置在 37℃,5%CO2 的培养箱中培养 3-5 天。 定向内胚层分化 4、在 60mm 培养皿中加入 2ml Matrigel,室温静置 2h 并添加 DMEM-F12 培养基至完全没过 Matrigel。 5、用不含 Ca2+/Mg2+ 的 PBS 冲洗 iPSCs 后,加入 300μl Accutase,37℃ 孵育
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