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- 2026年03月03日
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文献和实验相关实验
的基因沉默技术。 这种双链RNA由于其小于30bp将不会引起PKR系统的活化。 4.在哺乳动物细胞中产生的RNAi反应的试剂 有许多不同的试剂都可能在细胞中产生RNAi效应。 除了我们的 链状沉寂基于DNA方法外，还有各种形式的RNA或者环状质粒。直接用RNA的方法的问题包括了费用，稳定性和很难在细胞内维持高拷贝数量的。质粒DNA在另一方面是很难变化，包括克隆，因此不适合用于做高拷贝的应用。我们居于DNA的线状沉寂RNAi技术，克服了以上的许多困难，我们将在底下详细的叙述。由于转染
后，样品仍需继续延伸3～5min以上，确保扩增的DNA为双链DNA。为便于了解PCR反应中各成份的组成，加入量和反应条件，使人们以此为基础，对不同的研究对象逐项改变来找到最佳反应条件，特列举Perkin Elmer Cetus公司Gene Amp DNA试剂盒提供的典型反应条件供参考。 表22-1 PCR反应混合液 成分 加入体积（μl） 最终浓度 双蒸馏水 53
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