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- NEB
- M0201
- 2026年04月20日
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- 技术资料
| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | M0201 | T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK） | T4 Polynucleotide Kinase |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| M0201L | T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK） | T4 Polynucleotide Kinase | 2,500 units |
| M0201S | T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK） | T4 Polynucleotide Kinase | 500 units |
| M0201V | T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK） | T4 Polynucleotide Kinase | 250 units |
产品特点
- 对 DNA 或 RNA 进行 5' 磷酸化，以便进行连接反应
- DNA 或 RNA 的末端标记，用作探针和进行 DNA 测序
- 除去 3' 磷酸基团
T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链（双链或单链 DNA 或 RNA）的 5´-羟基末端以及 3´-单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶还具有 3´ 磷酸酶活性，将 3´-磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´-单磷酸核苷和脱氧 3´-二磷酸核苷上水解掉（1）。
产品来源
大肠杆菌菌株，携带有 T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK）基因。酶纯化参考改进 Richardson 方法进行（1）。- 产品类别:
- DNA 标记产品,
- 激酶产品
- 应用:
- Phosphorylation (Kinase)
备注：以上仅为 M0201 的部分产品信息，如需NEB货号 M0201 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等，请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
液： 1X T4 DNA Ligase Buffer: [50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 µg/ml BSA, (pH 7.5 @ 25°C)]。推荐DNA浓度(0.1 - 1 µM 的5′末端)。 使用注意：ATP是反应必须的辅因子。这一点与要求NAD作辅因子的大肠杆菌DNA连接酶不同。 如在反应体系中补加1 mM的ATP，连接反应还可以在NEB提供的四种限制性内切酶缓冲液(NEBuffers)或在T4 DNA多聚核苷酸激酶
的方法是：用平末端克隆法将片段插入已去磷酸化的载体上，(或使用NEB平端克隆试剂盒 #E0103)。插入片段的5"末端应磷酸化，除非在引物合成时，引物的5"末端已有磷酸基。 PCR产物是否能在PCR反应体系中直接磷酸化? 不能，因为PCR反应中的硫酸胺会抑制T4多聚核苷酸激酶活性。可采用胶回收或G25离心柱法来纯化DNA。在50 μl反应体系，加入1×T4 Polynucleotide Kinase Buffer、1 mM ATP 和 小于200 pmol的5"羟基末端
耐热DNA聚合酶常见问题(Thermpholic Polymerases FAQ)
)。插入片段的5'末端应磷酸化，除非在引物合成时，引物的5'末端已有磷酸基。 PCR产物是否能在PCR反应体系中直接磷酸化? 不能，因为PCR反应中的硫酸胺会抑制T4多聚核苷酸激酶活性。可采用胶回收或G25离心柱法来纯化DNA。在50 μl反应体系，加入1×T4 Polynucleotide Kinase Buffer、1 mM ATP 和 小于200 pmol的5'羟基末端的DNA，70°C温育5分钟，冰上冷却后，再加入20个单位的T4
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