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| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | M0543 | NEBNext®Q5®热启动超保真 PCR 预混液 | NEBNext®Q5®Hot Start HiFi PCR Master Mix |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| M0543L | NEBNext Q5 热启动超保真 PCR 预混液 | NEBNext® Q5® Hot Start HiFi PCR Master Mix | 250 rxns |
| M0543S | NEBNext Q5 热启动超保真 PCR 预混液 | NEBNext® Q5® Hot Start HiFi PCR Master Mix | 50 rxns |
产品特点
NEBNext® Q5 热启动超保真 PCR 预混液是独创的 Q5 DNA 聚合酶热启动 NEBNext 剂型。在所有的 NEBNext Ultra 试剂盒中,均含有此剂型,用于 DNA 和 RNA 文库制备。
不过,新推出的热启动剂型 NEBNext Ultra II Q5 预混液(NEB #M0544)现已商售,它能够进一步提高文库扩增的一致性,即使在 GC 富集区域依然表现优异。所有 NEBNext Ultra II 试剂盒中均包含 NEBNext Ultra II Q5 预混液,用于 DNA 和 RNA 的文库制备。
NEBNext® Q5 热启动超保真 PCR 预混液是独创的 Q5 DNA 聚合酶热启动 NEBNext 剂型。在所有的 NEBNext Ultra 试剂盒中,均含有此剂型,用于 DNA 和 RNA 文库制备。
NEBNext Ultra II Q5 预混液(NEB #M0544)现已商售,它能够进一步提高文库扩增的一致性,即使在 GC 富集区域依然表现优异。
这两种预混液中均含有 Q5 超保真 DNA 聚合酶,它是一种具备热稳定性的新型 DNA 聚合酶,具有 3´→5´ 核酸外切酶活性,并且融合了具有增强持续合成能力的 Sso7d 结构域。Q5 还具有异的保真度(比 Taq DNA 聚合酶高 280 倍),错配率极低。
这款便捷的 2X 预混液包含 dNTP、Mg++ 以及专有缓冲液,仅需加入引物和 DNA 模板,即可稳健扩增。加入热启动适配体后,可以更方便地在室温下建立反应体系。
备注:以上仅为 M0543 的部分产品信息,如需NEB货号 M0543 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等,请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利用片段互补法快速筛选二氢叶酸还原酶的快速折叠且稳定的克隆
1. 在 PCR 之前,用 T4 多核苷酸激酶(polynucleotide kinase ) 磷酸化引物使其可以进行连接反应。两个引物分别与被删区的两边配对。使用高保真的聚合酶,如 Pfu 或 Pfu Turbo , 进行 10~16 个循环的 PCR 反应。所得的 PCR 产物是不包含被删区的线性质粒。使 用 Dpnl 消化 PCR 产物,然后用乙醇沉淀,取 1/10 的 PCR 产物用于连接和转化,并筛选阳性克隆。插入移码是为了避免终止密码子被读通。PCR 方法来源于 ExSiteTM PCR 定向
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