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- 技术资料
| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | M0578 | Q5 Quick-Load™超保真 2X 预混液(直接上样) | Q5 Quick-Load™High-Fidelity 2X Master Mix |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| M0578L | Q5 Quick-Load™ 超保真 2X 预混液(直接上样) | Q5 Quick Load™ High-Fidelity 2X Master Mix | 500 rxns |
产品特点
- 便捷剂型实现高保真扩增
- 预混液包括 Q5® 超保真 DNA 聚合酶、dNTP、Mg++ 及用途广泛的专用缓冲液
- 性能优异,适用于各种扩增子(从高 AT 到高 GC)
- 包含惰性绿色示踪染料,便于直接将 PCR 产物上样到凝胶上
- 同时在售:Q5 聚合酶单酶剂型(NEB #M0491、NEB #M0493)及无色预混液剂型(NEB #M0492、NEB #M0494)
Q5 Quick-Load 超保真 2X 预混液(直接上样)采用便捷的预混液形式,具有优异的高保真性。该预混液含有 Q5,这是一种热稳定的高保真 DNA 聚合酶,表现出 3´ - 5´ 核酸外切酶活性,并且融合了具有增强持续合成能力的 Sso7d 结构域。Q5 的错误率仅为 Taq DNA 聚合酶的 280 分之一,能实现高度准确的扩增,还可用于扩增难扩增或较长的靶标(对于简单模板,最长可达 20 kb)。该预混液包含聚合酶、dNTP、Mg++ 以及便于直接将 PCR 产物上样到凝胶上的惰性绿色示踪染料。这种缓冲液应用广泛,不论模板 GC 含量多少,仅需加入引物和 DNA 模板即可进行高效扩增。
强烈建议使用 NEB Tm Calculator,确定给定引物组的最佳退火温度。
备注:以上仅为 M0578 的部分产品信息,如需NEB货号 M0578 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等,请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利用片段互补法快速筛选二氢叶酸还原酶的快速折叠且稳定的克隆
min,用 1 mmol/L 的 IPTG 诱导 4 h。然后每个克隆取出 60 μl,加入等体积 2X SDS- PAGE 上样缓冲液,电泳分析。可用考马斯亮蓝染色,或用抗 Histag 的抗体蛋白质印迹法检测蛋白质表达情况。 19. 在大规模提纯之前,建议测试几个克隆不同体积的产量。我们建议在变性条件下提纯蛋白质,是因为同时进行多个平行提纯时,它更易于操作。但是,如果蛋白质可溶性很好,也可以在非变性条件下提纯。本例中,表 达 raf RBD 突变体的 25 ml 的 BL21 pREP
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