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| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | M0494 | Q5®热启动超保真 2X 预混液 | Q5®Hot Start High-Fidelity 2X Master Mix |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| M0494L | Q5® 热启动超保真 2X 预混液 | Q5® Hot Start High-Fidelity 2X Master Mix | 500 rxns |
| M0494S | Q5® 热启动超保真 2X 预混液 | Q5® Hot Start High-Fidelity 2X Master Mix | 100 rxns |
| M0494X | Q5® 热启动超保真 2X 预混液 | Q5® Hot Start High-Fidelity 2X Master Mix | 500 rxns |
产品特点
Q5® 超保真 DNA 聚合酶为保真度和优异性能设立了新标准。Q5 具有的扩增保真度(约为 Taq 的 280 倍),错配率极低。Q5 是一种新型聚合酶,融合了具有持续合成能力强的 Sso7d DNA 结合域,能够提高反应速度、保真度和稳定性。
如果需要使用含尿嘧啶的 DNA 模板进行扩增或者在 PCR 反应中掺入 dUTP,可以了解 Q5U 热启动超保真 DNA 聚合酶(NEB #M0515)。
- 的扩增保真度(约为 Taq 的 280 倍)
- 预混液包括 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶、dNTP、Mg++ 及用途广泛的专用缓冲液
- 性能优异,适用于各种扩增子(从高 AT 到高 GC)
- 在售的批量购买剂型:M0494X = 1 瓶 x 12.5 ml
1. Josh Quick 2020. nCoV-2019 sequencing protocol v3 (LoCost). protocols.io
Q5® 热启动超保真 2X 预混液是一种热稳定的高保真热启动 DNA 聚合酶,具有 3´→5´ 核酸外切酶活性,并且融合了具有增强持续合成能力的 Sso7d 结构域,能够进行稳健的 DNA 扩增。通过核酸适配体抑制酶活,可在室温条件下建立反应体系。Q5 热启动超保真 2X 预混液的错配率不到 Taq DNA 聚合酶的二百八十分之一,是克隆的理想选择,可用于长片段或难扩增的扩增子。这款便捷的预混液浓度为 2X。本混合液包含 dNTP、Mg++ 以及应用广泛的专有缓冲液,不论模板 GC 含量多少,仅需加入引物和 DNA 模板即可进行高效扩增。终浓度为 1X(推荐使用)时,Q5 热启动超保真预混液含有 2 mM Mg++。Q5 热启动超保真 2X 预混液不同于常规的较低保真度的 PCR 酶。强烈建议使用 NEB Tm Calculator,确定给定引物组的最佳退火温度,
产品来源
大肠杆菌菌株,携带 Q5 超保真 DNA 聚合酶基因。- 产品类别:
- Q5® 超保真 DNA 聚合酶产品,
- 预混液产品
- 应用:
- Site Directed Mutagenesis,
- Site Directed Mutagenesis,
- High-throughput cloning and automation solutions,
- Hot Start PCR,
- Long Range PCR,
- Fast PCR,
- High-Fidelity PCR,
- Multiplex PCR,
- Specialty PCR,
- Routine PCR,
- DNA Amplification, PCR & qPCR,
- PCR, Fast Cloning: Accelerate your cloning workflows with reagents from NEB
备注:以上仅为 M0494 的部分产品信息,如需NEB货号 M0494 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等,请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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- 作者
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文献和实验,扩增目标片段 扩增片段与线性化载体、组装预混酶混合反应 转化感受态细胞 · Step 1 · 如果载体上正好有合适插入目标片段的酶切位点,酶切载体使之线性化。为了降低单酶切载体不完全的几率,减少载体自连和提高筛选成功率,强烈建议双酶切——后面一个切点只要距离第一个切点 5 个碱基以上就行(主要是给两个酶留出结合空间)。如果没有合适的酶切位点,根据选定插入位点设计引物,用反向 PCR 来获得线性化载体。在多片段组装克隆的世界里,凡是酶切搞不定的,统统 PCR 引物设计搞定。简单粗暴有效。 ·
性,因而即使是最具挑战性的模板也可以进行有效的RT-PCR.。 通过SuperMix形式快速合成cDNA SuperScript™ III First—Strand Synthesis SuperMix将所有进行强大的、灵敏的第一链cDNA合成所必须的组分组合成快速、易于使用的 SuperMix形式。SuperMix形式包含 2x RT缓冲反应混合物、dNTPs、MgCl2、 以及由SuperScript™ III RT和RNaseOUT™.组成的酶混合物。也提供优化的退火缓冲
个过一个 2.8 k,GC 比高达 92% 的基因 PCR,一共做了两周。从保真性最强的 pfx 50 到普通的 promega 2xGO Taq 都试过,什么 DMSO,甘油,Biorad 的 iproof with high GC Buffer, NEB one Taq 2x Taq High GC(还带 Enhancer 的),TAKARA 的 LA 都试过,都不行。要么不出带,要么就是乱七八糟的带一起来,头晕脑涨的我都打算抹平策略了,后来从别的实验室弄来一个 clontech 的 2 GC
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