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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
pCMV-dCpf1-BE0
- 保质期:
90天
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
质粒干粉
产品名称:pCMV-dCpf1-BE0质粒
别称:Plasmid#107678;pCMV-APOBEC1-XTEN-dLbCpf1(D832A/E1006A/D1125A)-SV40NLS-SGGS-UGI-SV40NLS
产品规格:质粒干粉
有效期:90天,请尽快转化。
保存温度:一般在-20℃,置于-80℃保存时间更长。
运输方式:常温运输,1周内。
应用领域:科研
复制子:
感受态:Stbl3
培养温度:37度
质粒宿主:哺乳细胞
质粒用途:基因敲除
注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。(请向客服QQ索要质粒信息目录)


使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
| pFUPI AoT5Cyp猫头鹰猴基因质粒 |
| pPH37酵母基因质粒 |
| pET28a-PPK大肠基因质粒 |
| pTXB1-Tn5大肠基因质粒 |
| pAX01-PPK大肠基因质粒 |
| pMA2775大肠基因质粒 |
| pdnaKp-EGFP大肠启动子质粒 |
| pcDNA-4mtD3cpv基因质粒 |
| pBAV1k-T5-LUX基因质粒 |
| pTE-10M0X其它基因质粒 |
| pSR58.6蓝藻基因质粒 |
| pTA7002-avrPto番茄基因质粒 |
| pE6c荧光基因质粒 |
| pSK+KanaRpsL抗性基因质粒 |
| pCY 3010-07抗性基因质粒 |
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文献和实验质粒转染细胞的效率受到多种因素的影响,如细胞的类型,细胞的状态,转染时细胞的密度,转染的方式(电转或化转),DNA 的质量、转染试剂的选择等。从质粒角度来看,超螺旋比例高,且内毒素残留低的质粒会更有利于提高细胞转染的效率。 pCMVβ DNA 用不同试剂盒提取,转染 Huh-7 细胞,转染效率对比 5. 质粒酶切有问题,切不开或者酶切有杂带 酶切切不开可能跟酶本身状态、酶切缓冲液、酶切温度以及质粒本身都有关系。从酶切条件考虑,在确保酶活性的前提下,选择合适的酶切缓冲液、温度
本人整理了论坛上关于战友所求助的各种质粒载体的图谱,后面所跟着的网站都是含有前面名称载体的详细图谱,希望对大家能有帮助! 质粒pGEM-4Z载体图谱 http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/5198013_0.html pGEX-4T-2载体图谱:http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/4211077_0.html pGEX-4T-1载体图谱:http://www.dxy.cn/bbs
一、材料和试剂 1. Hairpin-pLKO.1vector(OpenBiosystems) 2. Packagingvectors:第二代包装质粒包含gag,pol,和rev基因(pCMV-dR8.91或pCMV-dR8.74psPAX2)和包被质粒(pMD2.G)(Addgene) 3. 脂质体2000(Invitrogen) 4.OptiMEM无血清培养基(Invitrogen) 5. 293T包装细胞(ATCC)











