定量PCR参考染料

做 real-time PCR之前，你应该如何着手设计引物？做哪些准备？看完必会！

正在着手做 real-time PCR 的朋友们，我想最开始肯定要考虑引物设计的问题。 看完下面的文字，我保证你得到想要的引物设计方法和引物序列。 第一步：拿到你所要研究的基因的序列。不要告诉我你不会找序列。如果真的不会，请参考丁香园内其他版块，如NCBI使用，序列查找等。 第二步：确定你想用哪种方法。Taqman Probe 还是 SYBR 染料？ 两种方法各有利弊，这里不赘述，不明白的依然参见其他版块。但需要指出的是，后者在国内更常用，因为比较

qPCR常见问题及其分析

太高或者降解荧光染料的降解荧光定量PCR问题汇总1. 定量PCR仪的开关机顺序是怎样的？　　按照正确的开关机顺序操作，有助于延长仪器的使用寿命，减少仪器出故障的频率。　　开机顺序：先开电脑，待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机，等主机面板上的绿灯亮后即可打开定量PCR的收集软件，进行实验。　　关机顺序：确认实验已经结束后，首先关闭信号收集软件，然后关掉定量PCR仪主机的电源，最后关闭电脑。2. 哪些种类的反应管和盖子适合定量PCR实验使用？有何需要注意的地方？ 　　　　定量PCR实验可以使用以下耗材

荧光定量PCR：简介、原理、应用

可分为荧光探针和荧光染料。荧光探针又包括Beacon技术（分子信标技术，以美国人Tagyi为代表）、 TaqMan探针（以美国ABI公司为代表）和FRET技术（以罗氏公司为代表）等；荧光染料包括饱和荧光染料和非饱和荧光染料，非饱和荧光染料的典型代表就是现在最常用的SYBR GreenⅠ；饱和荧光染料有EvaGreen、LC Green等。 嵌合荧光染料法（SYBR GreenⅠ）SYBR Green I是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料，与双链DNA非特异性结合。在游离