miRNA加尾染料法荧光定量PCR试剂盒

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产品描述：

产品名称：miRNA加尾染料法荧光定量PCR试剂盒

描述:

产品介绍：
该产品采用本司生产的化学修饰的热启动聚合酶，使用SYBR Green I嵌合荧光法进行miRNA的荧光扩增，具有高度的特异性，能够有效避免引物二聚体形成和其它形式的非特异扩增。反应缓冲液经充分优化，PCR扩增效率高，荧光信号强，反应灵敏度优于多家同类产品。试剂盒免费配置优化后的Tag Primer，使miRNA的扩增效果更有保障。

产品特点：
1.使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，可有效避免非特异扩增；
2.反应缓冲液经充分优化，PCR扩增效率高，拥有更高的反应灵敏度；
3.免费提供优化的Tag Primer，miRNA的扩增效果更有保障。

使用方法:
一、按下表配制反应体系 ：取RNase-free离心管，配制如下混合液：2× miRNA SYBR Mastermix 10μl 、Tag Primer（10uM） 0.4ul、Specific primer（10uM） 0.4ul、Temlate DNA/cDNA 2.0ul、50×ROX Reference Dye 0.3ul、ddH2O to 20ul
* 可自行设计合成miRNA正向引物，我们也可免费提供设计。

二、设置反应条件：激活Taq 95℃ 5minPCR循环 95℃ 10S； 60℃ 30S； 40循环； 熔解曲线 95℃ 15S；60℃ 1min；95℃ 15S；1循环
* 仪器类型不同，熔解曲线采集程序不同，使用仪器默认熔解曲线采集程序即可

储存/保存方法: -20°C 避光储存，避免反复冻融；有效期1年

技术指标:
试剂盒组成：

注意事项: 
1、一般来说反应体系中引物终浓度为0.2μM可得到较好的扩增效果。当反应结果不理想时，可以在0.1-1.0μM范围内调整引物浓度。
2、加样体积一般不超过2.0ul，首次实验建议进行优化摸索，可分别取2.0ul RT原液及2、4、8、16、32、64倍稀释液进行qPCR。
3、如PCR结果不甚理想，可考虑采用3段法温度设置进行扩增，扩增条件为：95℃ 5min；95℃ 10S；60℃ 20S；70℃ 20S（收集荧光信号）。
4、试剂保存与操作过程中避免强光照射。
5、配制反应体系时，避免过于震荡，以防气泡产生。
6、公司免费提供引物设计，请与公司客服联系。
以合成的U6为样本，加A、反转录，使用本试剂盒，按本说明书进行qPCR，CT值小于20。如每次使用量较少，推荐小份分装使用。

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