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文献和实验-Triton蛋白分级抽提试剂盒细胞膜NP-40 or RIPA膜蛋白抽提试剂盒蛋白分级抽提试剂盒细胞核RIPA核蛋白抽提试剂盒线粒体RIPA线粒体蛋白抽提试剂盒亚细胞定位蛋白抽提试剂盒蛋白酶磷酸酶抑制剂抑制剂蛋白酶或磷酸酶PMSF丝氨酸蛋白酶抑制剂,如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和凝血酶,也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶Leupeptin 亮肽素抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶,如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶和组织蛋白酶BAprotinin 抑肽酶丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制纤维蛋白溶酶、激肽释放酶、胰蛋白
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量(垂直板型电泳)(图)
⑥1ml注射器及6号长针头 ⑦微量注射器(10μl或50μl) ⑧水泵或油泵 ⑨真空干燥器 ⑩培养皿(直径120mm) 2.试剂: (1)标准蛋白质 目前国内外均有厂商生产低分子量及高分子量标准蛋白质成套试剂盒,用于SDS-PAGE测定未知蛋白质分子量。 ①高分子量标准蛋白试剂盒(Pharmacia公司产品,表中16-1)。 表16-1 5种标准蛋白质 同时按说明书要求处理 ②
对蛋白质量的严苛要求。 案例二:番茄花脱落过程中生长素转运蛋白研究——柱式法适用于磷酸化蛋白质组学分析及Western Blot检测 Shi等人在探究生长素外排载体SlPIN1调控番茄花脱落机制的研究中(Scientific Reports, 7, 14919),使用Invent Minute™ 植物组织总蛋白提取试剂盒(SD-008/SN-009)提取了番茄花柄脱落区(AZ)的总蛋白,同时完成了两项关键检测: Western Blot检测总蛋白丰度:通过Western Blot检测
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